| 研究概要 |
我々は、細胞性粘菌Dictyostelium discoideumのミオシンII重鎖遺伝子を用い、遺伝子操作により、モーター活性を保持している最小ドメインを作成した。この最小モータードメインは、ミオシン重鎖N末端領域のアミノ酸760残基からできており、ミオシン軽鎖は含まない。このモータードメインは結晶化が容易で、さまざまなヌクレオチド(MgATP,MgADP,MgADP/BeFx,MgADP/AlFx,MgADP/vanadate,MgATPgSなど)を結合した状態で良質の結晶をえることができた。Wisconsin大学のRay ment研と共同研究で、こうした結晶の構造をX線結晶解析で解いたところ、これまでに2種類の構造が見つかった。MgATP,MgADP,MgADP/BeFx,MgATPgSを結合したミオシンモータードメインは互いに同一の構造で、MgADP/AlFx,MgADP/vanadateを結合したものは前者とは異なる構造をとる。結合しているヌクレオチドの形から、一応、前者はミオシン・ATP型に、後者はミオシン・ADP・Pi型に対応していると考えている。両者の違いはサブドメインの動きとして大体理解できる。とくに、モータードメインの中央部に位置している大きな切れ込みとモーターと軽鎖ドメインをつなぐ部分の変化が大きい。
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