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我々は神経細胞の特異性ならびに多様性を規定する分子機構について解析し、そこから得られる知見を神経変性疾患の治療に役立てようと考えた。第一段階としてDIAドパミン受容体と神経特異的転写因子であるPOU遺伝子ファミリーに注目した。DIA染色体遺伝子の上流域をCATレポータープラスミドに組み込み、様々な欠失クローンを作製して、CATアッセイに用いた。この際POU遺伝子群の発現ベクターを共にトランスフェクションして転写活性への影響を調べた。この結果第一イントロン内にPOUファミリーに属するBrn-4に反応して転写活性を上昇させるエンハンサーが存在することが明らかになった。このシス領域内にはPOU転写因子が結合するためのコンセンサス配列が2ヵ所あり、ゲルシフト法によって実際に転写因子が結合することが明らかになった。さらに生体内においてBrn-4がDIA受容体の転写調節に関わるかを推定するために、in situハイブリダイゼーション法を行なったところ線条体においてBrn-4とDIAが同一の神経細胞に発現していることが明らかとなった。これらの結果からBrn-4は線条体DIA発現神経細胞においてDIA遺伝子発現に関与していると考えられた。またこの過程で同一のシス領域に対しPOUの他のメンバーは異なる作用をもつこと、さらにより上流域にDIA遺伝子発現を抑制するサイレンサーが存在することが示唆された。今後はこれらの知見を用いてDIA遺伝子発現を処為的にコントロールすることを目指したい。
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