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1996 年度 実績報告書

遺伝子標識法を用いた植物土壌病原菌のモニタリングシステムの開発

研究課題

研究課題/領域番号 07660065
研究種目

基盤研究(C)

研究機関近畿大学

研究代表者

豊田 秀よし  近畿大学, 農学部, 助教授 (00150805)

キーワード標識遺伝子 / 細胞内ハイブリダイゼーション / フザリウム病菌 / 5-フルオロインドール / 遺伝子導入 / 蛍光プローブ / 抗菌作用 / モニタリング
研究概要

本年度の研究においては、導入遺伝子の細胞・組織化学的検出法の確立とモニタリングへの適用を検討した。まず、前者の研究課題においては、導入する標識遺伝子として、抗生物質であるハイグロマイシンの無毒化遺伝子、β-グルクロニダーゼ(GUS)生産遺伝子およびルシフェラーゼ生産遺伝子を用い、これらの遺伝子をベクター内に組み込んだプラスミドを作製し、病原菌類細胞で機能的に発現しうることを明らかにした。初年度の研究において、遺伝子導入法が確立されたので、その遺伝子の発現を多面的に検出するシステムを検討した。検出の方法としては、遺伝子から転写されたmRNAを検出する方法をとり上げ、標識したプローブによる細胞内ハイブリダイゼーションズを行った。この場合、ハイブリダイゼーションに用いるプローブを異なる蛍光色素(ロ-ダミン、フルオレッセイン等)で標識したので、複数のmRNAを同時検出することが可能であった。以上の結果は、本年(1996年)の日本植物病理学会報第62巻576頁から579頁に発表した。また、本法の詳細については、全国農村教育協会から刊行される著書『フザリウム病』において、『遺伝子標識法』として執筆した。一方、モニタリングシステムの構築に関する研究課題においては、病原菌がある種のインドール類縁化合物に対して異なる感受性を示すことを明らかにし、同じく日本植物病理学会報の第62巻414頁から417頁に発表した。

  • 研究成果

    (8件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (8件)

  • [文献書誌] 茶谷和行: "Resistance expression in self-pollinated progenies of tomato regenerants derived from fusaric acid-resistant calli against fungal" Plant Tissue Cutture Letters. 13・1. 87-89 (1996)

  • [文献書誌] 池田成志: "Cloning of a chitinase gene chi SH1 clened from gram-positive bacterium Kurthia zopfii and control of porvdery mildew of barley" Ann. Phytopathol. Soc. Jpn. 62. 11-16 (1996)

  • [文献書誌] 豊田秀よし: "Multiplication aitd translocation of tobacce mosaic virus microinjected into callus cells of TMV-resistant Line CMT-IRO3" Plant Tissue Culture Letters. 13・2. 211-214 (1996)

  • [文献書誌] 深溝慶: "Chitineus components of the cell wall of Fusarium oxysporum, its structure decluced from chitosanase digestion" Biosci. Biotech. Biochem.60・10. 1705-1708 (1996)

  • [文献書誌] 野々村照雄: "Spherical swelling of germ tubes and hyphae of Fusarium oxysporum by the treatment with 5-fluoroindole" Ann. Phytopathol. Soc. Jpn. 62. 414-417 (1996)

  • [文献書誌] 野々村照雄: "Application of different fluorochrome-lablecl prebes to simultaneous in situ hybridization of Fusarium oxysporum" Ann. Phytopathol. Soc. Jpn. 62. 576-579 (1996)

  • [文献書誌] 豊田秀よし: "Biotechnology in Agriculture and Forestry, vol36" Springer-Verlag, 359 (1996)

  • [文献書誌] 豊田秀よし: "Chitin Enzymology" Atec Edizioni, 612 (1996)

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公開日: 1999-03-08   更新日: 2016-04-21  

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