胃癌の発生、進展に関する癌関連遺伝子の変異の解析

1995 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07670194
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 小田 秀明 東京大学, 医学部(医), 助教授 (40214142)
• 研究分担者: 中鶴 陽子 東京大学, 医学部(医), 助手 (00237314)
• キーワード: 腎癌 / 肉腫様転換 / p53 / 遺伝子変異 / ホットスポット

研究概要

我々は肉腫様腎癌における増殖能の検討から、通常の組織型を示す腎癌が肉腫様に形態的変化をする際に著しく増殖能が高まることを見いだしている。本年度はこの増殖能の変化に対応する遺伝子変異をp53遺伝子、H-ras遺伝子を対象に検索した。パラフィンブロック切片より肉腫様部位と通常の腎癌部位それぞれから注意深くDNAを抽出し、p53のエクソン5-8、H-rasのエクソン1、2をPCR法にて増幅しプラスミドにサブクローニングした後シークエンスを行い変異の有無を調べた。この結果肉腫様部位ではp53変異が極めて高く(78.6%)しかもコドン278と244に変異の集中が認められた。これに比べ通常の腎癌部位ではp53変異は少なかった(14.3%)。変異の認められた部位には免疫組織学的にp53蛋白の過剰発現もみられた。H-ras遺伝子には調べた限り変異は認められなかった。以上の結果からp53遺伝子変異、特にコドン278、244の変異が腎癌の肉腫様転換に関与していることが明らかになった。以上の結果をふまえ、我々の見いだした変異の生物学的意味をさらに追求するため現在我々は細胞株を用いた研究を行っている。すなわち通常の組織型を示す腎癌細胞株にp53コドン278、244変異を導入した発現ベクターをトランスフェクションする実験を実行中である。この実験で変異導入細胞株に肉腫様の形態変化が観察されれば、腎癌の肉腫様転換におけるp53遺伝子変異の持つ意味がよりいっそう明らかになり、肉腫様転換のメカニズムの解明に進歩をもたらすことが期待される。

研究成果

• [文献書誌] Oda,H.et al.: "Mutation of the p53 gene and p53 protein overexpression are associated with sarcomatoid transformation in renal cell carcinoma." Cancer Res.55. 658-662 (1995)
• [文献書誌] Oda,H.,et al.: "A.mutational hot spot in the p53 gene is associated with hepatoblastoma." Int.J.Cancer. 60. 786-790 (1995)
• [文献書誌] Qin,X., Oda.H.,et al.: "Inhibitory effect of probucol on nephro-toxicity induced by ferric nitrilotriacetate(Fe-NTA)in rats." Carcinogenesis. 16. 2549-2552 (1995)
• [文献書誌] Imai,Y., Oda,H.,et al.: "A polymorphism at codon 160 of human O^6-methy lguanine-DNA methy ltransferase gene in young patients with adult type cancers and functional assay." Carcinogenesis. 16. 2441-2445 (1995)
• [文献書誌] Qin,X., Oda,H.,et al.: "Quantitative detection of ultraviolet light-induced photoproducts in mouse skin by immunohistochemistry." Jap.J.Cancer Res.86. 1041-1048 (1995)
• [文献書誌] Kurihara,Y., Oda,H.,et al.: "Aortic arch malformations and ventricular septal defect in mice deficient in endothelin-1." The J.Clin.Invest.96. 293-300 (1995)