新しいループス腎炎発症機序:血清アミロイドP・オリゴヌクレオソームの役割

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07670236
• 研究機関: 新潟大学
• 研究代表者: 森岡 哲夫 新潟大学, 医学部, 助教授 (00210146)
• 研究分担者: 清水 不二雄 新潟大学, 医学部, 教授 (40012728) ; 追手 巍 新潟大学, 医学部, 教授 (60018744)
• キーワード: ループス腎炎 / ヌクレオソーム / アミロイドP蛋白 / ヒストン / DNA / Immune complex / SLE / 糸球体基底膜

研究概要

ループス腎炎はSLEの臓器障害の予後を左右する重要な病態であり、糸球体係蹄壁に免疫グロブリン、補体の沈着が見られることから免疫複合体病と考えられている。
SLEは多くの自己抗体、とりわけ核抗原にたいする自己抗体を産生することが特徴である。特に抗dsDNA抗体は腎炎発症に先行して抗DNA抗体の血中抗体価が上昇する、ループス腎炎患者バイオプシーおよびループス自然発症マウスの腎から溶出してきた抗体には抗DNA抗体が含まれることなどからループス腎炎の病態発現にDNA-抗DNA免疫複合体が重要な役割を果たすと考えられてきた。しかしながらどのようにICが糸球体へ沈着するか不明であった。ICの糸球体への沈着機構を明らかにすることはループス腎炎の発症・進展の機序を探る上で重要である。我々(Morioka et al Kidney Int 45:991,1994)あるいは他のグループの研究結果からDNAを含むICの沈着には従来考えられていたような受け身的沈着ではなくGBMに親和性を持つヒストンのような陽性荷電物質を介しての沈着が大きな部分を占めることが明らかとなってきた。細胞核内においてはヒストン、DNAが互いに強く結合してヌクレオソームを形作っておりnecrosis、apoptosisなどの細胞死において核クロマチンから、freeのヒストン、DNAというよりはアリゴヌクレオソームの形で血中に放出される。これらのヌクレオソームと抗核抗体がICを形成する可能性がより高いと考えられる。
本研究ではヌクレオソームが糸球体に沈着しうるか、また血清中の主なるDNA結合蛋白であるアミロイドPがこの沈着にどのように関るかについて検討し以下に述べる結果を得たので報告する。
1)ループス腎症患者から得られた抗体と牛胸線DNA・鶏由来ヒストンを用いてin vitroにおいてヌクレオソーム-抗DNA抗体複合体を再構成した。このヌクレオソーム-抗DNA抗体複合体をラット腎に還流したところGBMに沿ってこの複合体の沈着を確認した。
2)ヒト糸球体基底膜にアミロイドP様物質が存在することを確認した。
3)ヒト糸球体基底膜に存在するアミロイドP様物質を介してDNA・ヌクレオソームがヒト糸球体基底膜に沈着する可能性をELISAを用いて示した。

研究成果

• [文献書誌] CHENG,QIAN: "Progressive renal lesions induced by administration of monoclonal antibody 1-22-3 to unitaterally nephrectomized rats" Clincal and Experimental Immunology. 102. 181-185 (1995)
• [文献書誌] OITE,TAKASHI: "Efficient isolation of rat endothelial cells by elimination of contaminating cells with a monoclonal antibody" Microvascular Research. 50. 113-118 (1995)
• [文献書誌] 追手、巍: "糸球体における内皮細胞とメサンギウム細胞の接着様式" 生理学研究所年報. 16. 297-298 (1995)
• [文献書誌] 森岡、哲夫: "ループス腎炎発症に果たすアポトーシスの役割" 医学の歩み. 178. 781-785 (1996)
• [文献書誌] NARISAWA-SAITO,MAKO: "Thy-1 molecule associate with protein tyrosine kinase in rat mesangial cells" Clinical and Experimental Immunology. 106. 86-90 (1996)
• [文献書誌] OITE,TAKASHI: "A specific Thy-1 molecular epitope expressed on rat mesangial cells" Experimental Nephrology. 4. 350-360 (1996)
• [文献書誌] MORIOKA,TETSUO: "Anti-DNA antibody derived from an SLE patient froms histone-DNA-anti-DNA complexes that bind to rat glomeruli in vivo" Clinical and Experimental Immunology. 104. 92-96 (1996)
• [文献書誌] FUJIGAKI,YOSHIHIDE: "Structural contimuity of filtration slit (slit diaphragm) to plasma membrane of podocyte" Kidney International. 50. 54-62 (1996)
• [文献書誌] 追手、巍: "糸球体における内皮細胞とメサンギウム細胞の接着様式" 生理学研究所年報. 17. 267-268 (1996)
• [文献書誌] OITE,TAKASHI: "Recent Advances in Molecular Nephrology" M.ARAKAWA & NAKAGAWA Eds., 119 (1996)