細胞接着因子によるウイルス細胞傷害作用制御の分子機構

1995 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07670342
• 研究機関: 三重大学
• 研究代表者: 伊藤 康彦 三重大学, 医学部, 教授 (00022872)
• キーワード: 細胞接着因子 / パラミクソウイルス / HIV / 細胞融合 / FRP-1 / CD98 / Tyrosine Protein Kinase

研究概要

パラミクソウイルスやHIVによる細胞傷害の主要な機序の一つは細胞融合、多核巨細胞形成、である。ウイルス誘導および生理的細胞融合に細胞融合を制御している宿主因子としてFusion Regulatory Factor-1(FRP-1、CD98)見い出した。抗FRP-1抗体を細胞に作用させるとパラミクソウイルスやHIVによる細胞融合が増強される。本年度はFRP-1発現L929細胞を用いて、新たな抗FRP-1モノクローナル抗体を3個作製した。そのうちの一つ、18-1-2、は抗FRP-1抗体処理U2ME-7細胞(HI Vgp160発現U937-2細胞)の細胞凝集には影響を与えることなく、細胞融合、多核巨細胞形成、を抑制した。このことはFRP-1分子をManipulationすることによってパラミクソウイルスやHIVの細胞傷害作用を制御できることを示唆している。抗β1インテグリン抗体やファイブロネクチンを抗FRP-1抗体処理U2ME-7細胞に作用させると多核巨細胞形成を抑制した。抗FRP-1抗体による細胞融合誘導の分子機構を解析するために、Protein Kinase阻害剤の効果を調べた。H-7、HerbimicinやGenisteinは抗FRP-1抗体による細胞融合誘導を阻害した。抗Phosphotyrosine抗体で解析すると抗FRP-1抗体によって幾つかの蛋白のTyrosineが燐酸化されていた。これらの事実は抗FRP-1抗体による細胞融合誘導にはProtein Kinase、特にTyrosine Protein Kinase、が関与していることを示している。このことから、細胞接着因子によるウイルス細胞傷害作業制御におけるTyrosine Protein Kinaseの役割の重要性が浮かび上がってきた。

研究成果

• [文献書誌] 湯浅徹也: "A Cell Fusion-inhibiting Monoclonal Antibody Binds to the Presumed Stalk Domain of the Human Parainfluenza Type2 Virus Hemagglutinin-Neuraminidase Protein." Virology. 206. 1117-1125 (1995)
• [文献書誌] 田端信忠: "Tissue distrib ution of fusion regulatory protein(FRP)-1 and FRP-2." Arch.Pathol.Lab.Med. 119. 461-466 (1995)
• [文献書誌] 扇本真治: "Molecular Characterization of Fusion Regulatory Protein-1(FRP-1)that Induces Multinucleated Giant Cell Formation of Monocytes and HIV gp160-Mediated Cell Fusion:FRP-1 and 4F2/CD98 Are Identical Molecules." J.Immunology. 155. 3385-3592 (1995)
• [文献書誌] 鶴留雅人: "Identification of regions on the hemagglutinin-neuraminidase protein of humanparainfluenza virus type 2 important for promoting cell fusion." Virology. 213. 190-203 (1995)
• [文献書誌] 駒田洋: "Gene Structure of Human Parainfluenza Type 4A and 4B Virus Fusion Proteins and Antigenicity of the Fusion Proteins Expressed in Mammalian Cells" J.General Virology. 76. 3205-3205 (1995)
• [文献書誌] 菅秀: "Identification of fusion regulatory protein(FRP)-1/4F2 related molecules" Cell Structure and Function. 20. 473-483 (1996)
• [文献書誌] 渡辺典子: "Identification of the Sequences Responsible for the Nuclear Targeting of the Parainfluenza Type 2 Virus V Protein." J.General Virology. (1996)
• [文献書誌] 菅秀: "Intracellular localization of antigens recognized by anti-vimentin monoclonal antibodies(mAb)" European J.Cell Biology. (1996)