| 研究概要 |
申請者らは,肝類洞内皮細胞はトロンビンの不活性化に際して最も重要な抗凝固因子と考えられているトロンボモジュリンの発現が軽微であることを見いだした。更に,tissue factorによる血液凝固の開始を抑制するtissue factor path way inhibitor (TFPI)が肝類洞内皮細胞には発現していないことも明らかにした。これら他臓器末梢血管と著しく異なる肝類洞の内皮細胞における特殊性は,同所性肝移植後肝不全の成立に関与していると考えられ,標的抗凝固療法としてはTFPI及びトロンボモジュリンを補給する方針を決定した。
TFPIはヘパリンと結合する性質を利用して,蛋白レベルでの標的療法が可能であることを明らかにした。組替え型TFPIをラットに静注すると血中から速やかに消失するが,抗TFPIポリクローナル抗体を用いた免疫電顕により類洞内皮細胞及びDisse腔内の肝細胞微縦毛膜に結合していることを証明した。この染色性はヘパリンナトリウムを静注すると減弱し,TFPIが血中で再び検出されることから同部のヘパリノイドに結合していると考えられた。トロンボモジュリンはcDNAを用いた遺伝子レベルでの標的療法の開発が進行中である。遺伝子導入に必要なトロンボモジュリンの全長cDNAをクローニングした。疎水性のポリビニルと親水性のマンノースを結合して水層内でミセルを作成し,マンノース受容体を利用して類洞内皮細胞にcDNAを導入する方法を確立した。
また,移植肝では類洞内皮細胞が障害されているため,その再生を促進することも類洞内凝固の治療に際して有効と考えられる。申請者らは,類洞内皮細胞の再生にはVGEFを介した肝構成細胞の相互作用が重要な役割を担っていることを明らかにし,これを調節する治療法の端緒をも見いだした。
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