福山型先天性筋ジストロフィー原因遺伝子単離と遺伝子診断

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07670699
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 戸田 達史 東京大学, 医科学研究所, 助教授 (30262025)
• キーワード: 福山型先天性筋ジストロフィー / ポジショナルクローニング / 9番染色体長腕31 / 連鎖不平衡 / コスミドコンティグ / 創始者染色体 / 遺伝子診断 / 出生前診断

研究概要

福山型先天性筋ジストロフィー(FCMD)は,先天性筋ジストロフィーに,脳奇形を伴う常染色体制劣性遺伝疾患であり、日本に多く、悲惨な病気であるが、本態はほとんどわかっていない。申請者らは本症の遺伝子が第9番染色体長腕31-33領域に存在することを報告してきた。本研究では、1.本症の病態解明へむけて、第9番染色体長腕31のごく狭い領域に絞りこまれたFCMD原因遺伝子を単離することと、2.この領域に存在するマーカーを使って、本症家系での出生前診断、発症前診断、保因者診断を行うことを目的としている。当該年度は、
1.連鎖不平衡マッピングによりFCMD遺伝子はD9S2107を含んだ約100kb以下の領域に存在する可能性を報告したが、今回この周辺のコスミドコンティグとEcoRI制限地図を作製した。
2.新たにE6、J7のマーカーを単離し、D9S2105、D9S2107と組み合わせてハプロタイプを調べたところ、創始者ハプロタイプを示すFCMD染色体は80%、患者の95%がこのハプロタイプのホモまたはヘテロであった。それ以外にあと数本のFCMDハプロタイプが同定され、日本のFCMD変異は、数回起きたものと考えた。このハプロタイプは正常染色体には見い出されていない。創始者ハプロタイプを不完全に持つFCMD染色体の解析から、遺伝子はE6から動原体側のごく近い所に存在すると予想した。
3.さらにこの予想した所に、患者DNAのほとんどが約3kbの「挿入」を示すプローブを見い出した。この挿入はFCMD染色体138本中120本(86%)に認められ、ハプロタイプによる創始者染色体に一致した。一方、無関係な正常人では、この挿入は88人中1人にヘテロで認められたのmiで、日本人のFCMD保因者頻度によく一致していた。この挿入はFCMDの原因自体に密接に関与している可能性があるとともに、診断にも使用できる。

研究成果

• [文献書誌] Nakano I,……,Toda T.: "Are breaches in the glia limitans the primary cause of the micropolygyria in Fukuyama-type congenital muscular dystrophy(FCMD)?-Pathological study of the cerebral cortex of an FCMD fetus." Acta Neuropathol. 91. 313-321 (1996)
• [文献書誌] Yamamoto T,……,Toda T.: "Fukuyama congenital muscular dystrophy:Cortical dysplasia of the cerebrum in a 20 week fetus." Neuropathology. 16. 184-189 (1996)
• [文献書誌] Toda T,……: "Linkage-disequilibrium mapping narrows the Fukuyama-type congenital muscular dystrophy(FCMD)candidate region to<100kb." Am J Hum Genet. 59. 1313-1320 (1996)
• [文献書誌] Kondo E,……,Toda T,……: "Prenatal diagnosis in Fukuyama type congenital muscular dystrophy by polymorphism analysis." Am J Med Genet. 66. 169-174 (1996)
• [文献書誌] Kondo-Iida E,……,Toda T.: "Molecular genetic evidence of clinical heterogeneity in Fukuyama type congenital muscular dystrophy." Hum Genet. (in press).
• [文献書誌] Miyake M,……,Toda T.: "YAC and cosmid contigs encompassing the Fukuyama-type congenital muscular dystrophy(FCMD)candidate region on 9q31." Genomics. (in press).