| 研究課題/領域番号 |
07670889
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
小児科学
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| 研究機関 | 大阪市立大学 |
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研究代表者 |
一色 玄 大阪市立大学, 医学部, 教授 (80046995)
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| 研究分担者 |
岡野 善行 大阪市立大学, 医学部, 講師 (60231213)
田中 あけみ 大阪市立大学, 医学部, 講師 (30145776)
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| 研究期間 (年度) |
1995 – 1997
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| キーワード | ガラクトース血症 / ガラクトキナーゼ / ガラクトース-1ーリン酸ウリジルトランスフェラーゼ / 遺伝子変異 / 遺伝子発現 / 先天性代謝異常症 |
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| 研究概要 |
1)ガラクトース血症I型(GALT欠損症) 患者mRNA検体からのRT-PCR法及び患者ゲノムDNA検体からの変成ゲル濃度勾配電気泳動法(DGGE)による遺伝子解析から、患者13人、11家系において13の遺伝子変異を同定することができた。これまで報告された2家系2つの遺伝子変異を加えることで、遺伝子変異の解析率を95%とすることができた。その中で、軽症型であるDuarte異型の分子遺伝学的特徴は白人種と同様にN314D変異であり、また、RFLP解析でSacl(-)を示すことから、日本人種と白人種で同一の起源すなわち極めて古い時代に発生したと考えられる。一方、古典型のGALT遺伝子変異は日本人固有の遺伝子変異であり、比較的新しい時期に発生したと推測される。これまでに同定した遺伝子変異のCOS細胞を用いた変異蛋白発現試験の結果では、進行する精神運動発達遅滞と卵巣機能不全を主症状とする後期症状の発症は遺伝子変異より求められたin vitro GALT活性の残存活性が30%未満の場合に発症するという結果を得ることができた。今後、臨床表現型と遺伝子型の相関、その異常酵素蛋白の特徴を明らかにする。
2)ガラクトース血症II型(GALK欠損症) ヒトゲノムDNAコスミッドライブラリーからGALKcDNAでスクリーニングを行ない、ガラクトキナーゼのゲノムDNAが7.3kbにわたり8個のエクソンから構成されていることを明らかにした。遺伝子変異の検索結果では、古典型の3つのミスセンス変異と2つの欠失変異を同定した。特にこれまでGALK欠損症患者では世界的に詳しい報告がなされていない異型について、我々は、日本人家系に共通する異型『Osaka』の変異を確認しており、その分子遺伝学的解析と酵素免疫学的な解析を行なっている。
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