| 研究課題/領域番号 |
07671210
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 研究機関 | 広島大学 |
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研究代表者 |
小田 健司 広島大学, 原爆放射能医学研究所, 助手 (90211143)
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| 研究分担者 |
兵頭 英出夫 広島大学, 医学部・附属病院, 助手 (30253074)
下村 壮司 広島大学, 原爆放射能医学研究所, 助手 (20263741)
藤元 哲郎 広島大学, 保健管理センター, 助手 (00221549)
藤村 欣吾 広島大学, 原爆放射能医学研究所, 助教授 (80034114)
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| キーワード | 特発性血小板減少性紫斑病 / T細胞クロノタイプ / SSCP解析 |
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| 研究概要 |
特発性血小板減少性紫斑病(ITP)患者におけるT細胞異常を検出する目的で、患者末梢血単核球よりReverse transcriptase(RT)-polymerase chain reaction(PCR)によってT細胞受容体(TCR)β鎖complementarity determining region 3(CDR3)領域を増幅し、Single strand conformation polymorphism(SSCP)解析を行った。その結果、ITP患者ではT細胞のクローン性増殖を示す明瞭なバンドが健常人対照と比較して、複数のVβ遺伝子において有意に増加していた(ITP患者で平均15.5、標準偏差8.9、健常人で平均2.8、標準偏差2.6、p<0.01)。特に頻度の高い傾向があった遺伝子群はVβ3、6、10、13.1および14.1であった。これらのバンドがクローン性のT細胞由来であることを確認するために患者末梢血単核球をIL-2およびPHAによって非特異的に刺激した後、当該患者の脾摘によって得られた脾巣細胞やEBVトランスフォームB細胞株をfeederとして限界希釈によっていくつかのT細胞株を得、それらのクロノタイプを上記のSSCPによって解析し、患者末梢血単核球で得られた結果と比較した。患者K. O. より得られたT細胞株はいずれもCD4 single positive細胞であり、クロノタイプ解析した3つのT細胞株(Vβ6、13.1、14)のうち最初の2つは末梢血で見いだされたものと一致した。以上のことよりITP患者ではT細胞クローン集積が高頻度に認められ、自己免疫による血小板の破壊亢進機序への関連が示唆された。
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