染色体テロメアを用いた造血器悪性腫瘍の分子生物学的予後診断

1995 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07671224
• 研究機関: 昭和大学
• 研究代表者: 小峰 光博 昭和大学, 医学部, 教授 (30008552)
• 研究分担者: 石川 冬木 東京工業大学, 生命理工学部, 助教授 (30184493)
• キーワード: テロメレース / 白血病

研究概要

腫瘍細胞に特異的に存在すると考えられるテロメレースは、新しい抗腫瘍剤の作用点としてきわめて有望な候補の一つと期待される。ヒト・テロメレースはその活性が非常に低いために、高感度かつ特異性の高い検出方法の開発が望まれていたが、我々はテロメレース産物をPCR法によって遺伝子増幅し解析することが非常に有用であることを見いだした。そのようにして得られた"Stretch PCR法"は、現在、汎用されている"TRAP assay"と比較すると、感度、特異性のみならず、定量性において大変優れた方法であることが明らかになった(Tatematsu et al., submitted)。すなわち、PCRを用いる場合、反応の基質となるテロメレース産物の量(これは活性と比例すると考えられる)と最終的なPCR生成産物の量とは必ずしも相関しない場合が多いが、我々は反応条件、プライマーの配列を十分に検討することにより、非常に広い範囲のテロメレース活性について良好なdose-response曲線を得ることに成功した。このような検出系の特徴は、たとえば、阻害剤を開発するためにはきわめて重要な要件であると考えられる。
次に、我々は慢性骨髄性白血病(CML)、急性骨髄性白血病(AML)および健常者由来の血液細胞について"Stretch PCR法"により、それぞれテロメレース活性を定量化することに成功した(Tatematsu et al., submitted)。その結果、正常末梢血有核細胞にはポジティブ・コントロールとした白血病細胞株U937の1/10^4以下の微量のテロメレース活性しか存在しないことが分かった。CML慢性期においては、正常血液細胞と同程度の活性しか存在しなかったが、急性転化症例ではU937細胞の数十%の強いテロメレース活性が検出された。一方、AMLのうち初発例では、一般に弱い活性しか検出されなかったのに対し、再発例では強い活性が検出された。以上の事実は、テロメレースが正常細胞ではほとんど発現しておらず、腫瘍細胞においてもCMLの急性転化例やAML再発例など、従来の抗がん剤が無効であることの多いいわゆる難治性がんでおきていることを示している。

研究成果

• [文献書誌] Higuchi, T., H. Niikura, M. Omine, et al.: "Prognostic implications in myelodysplastic syndromes. A review of 62 cases" Leukemia & Lymphoma,. (in press).
• [文献書誌] Higuchi, T., H. Mori, M. Omine, et al.: "Hypocomplementemia and hematological abnormalities in immunoblastic lympadenophathy (IBL) and IBL-like T-cell lymphoma" Acta Haematologica.,. (in press).
• [文献書誌] Higuchi, T., S. Okada, M.Omine, et al.: "Leukemic transformation of polycythemia vera and essential thrombocythemia possibly associated with an alkylating agent" Cancer. 75. 471-477 (1995)
• [文献書誌] Karasawa, M., N. Tsukamoto, M. Omine, et al.: "Clonality of T-lymphocytes in myelodysplastic syndromes and chronic myeloproliferative disorders" Myelodysplastic Syndrome Advances in Reseach and Treatment.121-128 (1995)
• [文献書誌] Niikura, H., K. Fujita, M. Omine, et al.: "Platelet dysfunction in myelodysplastic syndrome" Myelodysplastic Syndrome Advances in Reseach and Treatment.169-172 (1995)
• [文献書誌] Kajita, Y., Nakayama, J., Aizawa, M., and Ishakawa, F: "The UUAG-specific RNA binding protein, hnRNP D0 : Common modular structure and binding properties of 2xRBD-Gly family" J. Biol. Chem.270. 22167-22176 (1995)