| 研究課題/領域番号 |
07671306
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 研究機関 | 岡山大学 |
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研究代表者 |
合地 明 岡山大学, 医学部・付属病院, 助手 (10186877)
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| 研究分担者 |
松原 長秀 岡山大学, 医学部付属病院, 医員
清水 憲二 岡山大学, 医学部, 教授 (10037286)
田中 紀章 岡山大学, 医学部, 教授 (10127566)
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| キーワード | 大腸癌 / E2F-4 / DNA修復異常 / microsatellite instability / CAG繰り返し配列 |
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| 研究概要 |
(目的)DNAミスマッチ修復機構の異常により発症するとされる非ポリポ-ジス性家族性大腸癌(HNPCC)を始めとする一連の癌においては、修復異常の次に何が起こるのか良く分かっていない。破綻したmutator遺伝子のターゲットとして、一部の癌腫でTGF-BtypeII receptor (TGFBII)にmutationがあることが解ってきたが、それ以外のターゲットは不明である。一方、細胞周期に関連する転写活性因子E2F-4のcoding領域にCAG繰り返し配列があり、mutator遺伝子の有力な標的になりえると考えて、以下の研究を行った。
(方法)当科で手術された20名の大腸癌患者の癌部及び非癌部より抽出したRNAよりE2F-4の全coding領域のcDNAのlongRT-PCRを行い、DpnII,BfaIで切断した後、SSCP解析を行った。変異の見られたものについてsequenceを行い、変異部を明かにし、さらに同一の変異をgenomic DNAにおいて確認した。また4種のmicrosatellite markerをもちいてMI(microsatellite instability)を検討した。
(結果)解析したsporadic大腸癌の20例中、MI(+)の2例に一致してE2F-4遺伝子のCAG繰り返し数の変異(減少及び増加)が癌特異的に見られた。
(考察)MI(+)を示すsuporadic大腸癌では、HNPCCでみられる程TGFBIIの異常が無いことが報告されており、ターゲット遺伝子の発見が待たれていた。今回の検討で、MI(+)を示すsuporadic大腸癌で高頻度(2/2)に、癌特異的なE2F-4遺伝子の変異が見つかり、破綻したmutator遺伝子のターゲットとして大腸の発癌機構に関与している可能性が示された。
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