DNA修復エラーとアポトーシスから検討した大腸腺腫の発癌ポテンシー

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07671437
• 研究機関: 近畿大学
• 研究代表者: 綿谷 正弘 近畿大学, 医学部, 講師 (00220856)
• 研究分担者: 肥田 仁一 近畿大学, 医学部, 助手 (20238306) ; 久保 隆一 近畿大学, 医学部, 講師 (70225192)
• キーワード: DNA修復エラー / アポトーシス / 大腸腺腫 / 大腸癌 / p53遺伝子異常 / Bcl-2遺伝子 / p21^<WAF1>遺伝子 / PCNA

研究概要

大腸腺腫の発癌ポテンシーとアポトーシスの抑制ならびにDNA修復エラーの関連を明らかにする目的で、1.大腸癌発生のどの過程でbcl-2遺伝子発現と変異型p53遺伝子蛋白発現が働きアポトーシスが抑制され、腺腫から癌へと進行しているのか、2.さまざまな異型度の腺腫を対象にdinudeotides instabilityを解析し、DNA replication errorとアポトーシスが関連するかを検討した。81例の初発腺腫と20例のsm癌を対象にp53およびbcl-2発現が解析すると、p53発現はmild dysplasia腺腫で2%、moderate dysplasia腺腫で12%、severe dysplasia腺腫で33%、sm癌では65%に認められた。p53発現と腺腫の異型度ならびに癌の深達度に有意な相関がみられた。bcl-2発現はmild dysplasia腺腫で28%の頻度で認められたが、moderate dysplasia、severe dysplasia腺腫、sm癌と異型度・深達度が進行しても、bcl-2発現は47%、48%、55%であった。次にLow garde dysplasia(LGD)腺腫60例、high grade dysplasia(HGD)腺腫21例およびsm癌13例を対象に細胞周期調節と大腸癌発生進展を検討した。PCNA陽性細胞率は腫瘍の異型度の進展とともに増加したが、p21^<WAF1>発現はHGD腺腫やsm癌と比べてLGD腺腫に高頻度にみられた。HGD腺腫でp53陰性・p21^<WAF11>発現陽性群のPCNA陽性細胞率は、p53陽性・p21^<WAF11>発現陽性群より有意に低く、またp53陰性・p21^<WAF11>発現陽性群のPCNA陽性細胞率もp53陽性・p21^<WAF11>発現陽性sm癌より低かった。初発腺腫のHGD腺腫の一部でp53非依存的にp21^<WAF11>発現が誘導され細胞増殖が抑制される可能性が考えられる。さらに癌・腺腫のDNA修復エラーを解析した。初めに大腸癌における遺伝子不安定性を検討すると、非遺伝性の大腸癌87例中27%に遺伝子不安定性が認められた。次に腺腫のホルマリン固定パラフィン包埋切片からDNAを抽出し、DNA修復エラーを検討した。しかしながらDNAは抽出されたもののmicrosatellite markerのPCR増幅が悪く、腺腫での遺伝子不安定性は解析できなかった。

研究成果

• [文献書誌] M.Watatani, et al: "Allelic loss of chromosome 17p,mutation of the p53 gene,and microsatellite instability in right-and left-sided colorectal cancer" Cancer. 77. 1688-1693 (1996)
• [文献書誌] M.Watatani, et al: "Bcl-2 and p53 expression in metachronous colorectal adenomas compared with initial adenomas in relation to the degree of dysplasia" Recent advanced in Gastronterological carcinogenesis. 371-375 (1996)
• [文献書誌] K.Kuroda, M.Watatani, et al: "Expression of p53,p21 WAF1 and bcl-2 during colorectal tomorigenesis" Recent advanced in Gastronterological carcinogenesis. 365-369 (1996)
• [文献書誌] S.Ieda, M.Watatani, et al.: "Immunohistochemical analysis of p53 and ras p21 expression in colorectal adenomas and early carcinomas" Surg Today. 26(4). 230-235 (1996)
• [文献書誌] T.Yoshida, M.Watatani: "Relationship of changes of p53 gene and microsatellite instability to progression of colorectal cancer." Acta Med kinki Univ. 20(4). 369-376 (1995)
• [文献書誌] 家田眞太郎, 綿谷正弘: "大腸癌切除後異時性腺腫発生におけるp53遺伝子蛋白発現とbcl-2遺伝子蛋白発現の生物学的役割-初発腺腫との比較から-" 日本大腸肛門病会誌. 49(3). 191-198 (1996)