1996 年度研究成果報告書概要

心筋虚血再潅流障害における特異的遺伝子発現からみた心筋保護の研究-特に高齢心筋・病的心筋における虚血応答分子メカニズムについて-

研究課題

研究課題/領域番号	07671468
研究種目	基盤研究(C)
配分区分	補助金
応募区分	一般
研究分野	胸部外科学
研究機関	神戸大学
研究代表者	安宅啓二神戸大学, 医学部・附属病院, 助手 (20252760)
研究分担者	築部卓郎神戸大学, 医学部・附属病院, 医員山下長司郎神戸大学, 医学部・附属病院, 講師 (00144569)
研究期間 (年度)	1995 – 1996
キーワード	心筋虚血 / 心筋保護 / アポトーシス
研究概要	高齢日本白ウサギ(年齢3歳以上)の摘出心を心灌流装置(ランゲンドルフ灌流装置)にて灌流した後、30分間の虚血再灌流を行い心筋保護液の効果について検討を行った結果、心筋保護液投与群ではほぼ100%の心機能の回復がみられたのに対し、心筋保護液非投与群では心機能の回復の低下を認めた。再灌流障害の結果として心筋細胞のアポトーシスがみられるかどうかを検討するために、組織切片上でend nick labelling法(以下TUNEL法)を用いたが、結果は虚血及虚血再灌流の両群においてもアポトーシスは検出できなかった。 Free radicalは老化や虚血再灌流の際の細胞障害の重要な因子と考えられており、また細胞核に直接働いてDNA fragmentationを起こすとされている。心筋細胞はミトコンドリア豊富な細胞であるため、再灌流時には大量のfree radicalが産生されると考えられる。そこで、成熟日本白ウサギの冠動脈左前下行枝の結紮による局所的虚血再灌流モデルを作成し、end nick labelling法(TUNEL法)によるアポトーシスの発生を検討した結果、虚血再灌流モデルでは、15分以上の虚血時間でTUNEL法陽性の心筋細胞が認められた。以上より、TUNEL法を用いることで早期の虚血再灌流障害の検出が可能であり、心筋保護効果の判定に有用と考えられた。