| 研究概要 |
^<31>PNMR法を用いて心筋のfree[Mg^<2+>]_iを測定し,細胞内Mg動態と細胞外液の無機リン酸(Pi)の関係について検討した.大塚電子製BEM250/80NMR分光計を用い,線形予測z変換(LPZAR)によって^<31>PNMRスペクトルを測定し,free[Mg^<2+>]_iは結合型および遊離型ATPのα位とβ位リンの共鳴周波数から算出した.実験は,Wistarラット摘出心(n=9)を用いて,灌流液の[Mg^<2+>]を0.52mMから20mMに変更した場合と,灌流液の[Pi]を1.2mM,5.0mM,さらに1.2mMと変化させた場合の2通りでLangendorff灌流を行った.LPZARによるスペクトルは,FFTに比べSN比が高く容易に共鳴周波数の差を確定できた.灌流液の[Mg^<2+>]を0.52mMから20mMと変化させると,ATPβ位リンのピークは低磁場側に偏位し,free[Mg^<2+>]_iはそれぞれ0.537mMと0.731mMであった.灌流液の[Pi]を,1.2mMから5.0mMと変化させるとATPβ位リンのピークは高磁場側に偏位し,[Pi]を1.2mMに戻すとβ位リンのピークはcontrolの位置に戻った.算出されたfree[Mg^<2+>]_iは,1.2mMPi溶液では0.525【,+-。】0.048mM,5.0mMPi溶液では0.407【,+-。】0.025mMと有意(p<0.05)に低下し,再び1.2mMPi溶液に戻すと0.601【,+-。】0.053mMと上昇した.灌流液の[Pi]が1.2mM,5.0mM,1.2mMと変化すると,細胞内ΣATPに対するMgATPの濃度比はそれぞれ91.7【,+-。】0.7%,89.8(]SY,+-。])0.7%,92.8(]SY.+-。[)0.6%と変化した.^<31>PNMR法により,細胞外液[Pi]が上昇した際のfree[Mg^<2+>]_iの減少が直接観測され,心筋細胞膜におけるMgイオン輸送系の存在が示唆された.
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