| 研究概要 |
単純ヘルペスウイルス(Herpes Simplex Virus,HSV)を利用した悪性腫瘍に対する遺伝子治療の研究を行った。HSVの細胞障害活性は両刃の刃であるが、その細胞障害活性を何らかの方法で腫瘍細胞のみに向けられるようにコントロールできれば、replication competentなmutant HSVは理想的な遺伝子治療用ウイルスと考えられる。複製極初期に発現されるICP4はHSVの自己複製に重要であり、ICP4欠損HSVはこれ自体では遺伝子複製不能であり増殖できない。よって、ICP4遺伝子を腫瘍特異的な遺伝子プロモーターの下流に接続し、ICP4欠損変異型HSVに導入できれば、そのプロモーターが働く腫瘍細胞でのみウイルス遺伝子が複製され、その細胞を特異的に破壊することが期待される。われわれはhepatoma-specificなalbumin enhancer/promoter (e/p)を利用し、ICP4欠損変異型HSVにalbumin e/pによりICP4遺伝子をdriveする組換えウイルスG92Aを作成し、その分子ウイルス学的特性の解析を行った。G92AはSouthern Blot Analysisにて、狙い通りの遺伝子構築を確認しえた。また、G92Aはalbumin産生肝細胞癌に対しては、非albumin産生腫瘍細胞株に比べ、1000倍以上のプラーク形成能を認めた。また、in vitroにおいて、G92Aは肝細胞癌株においてはreplicationを示したが、非肝細胞癌においてはほとんどreplicationを示さなかった。in vivoにおいてもG92Aはヌードマウスに作成した肝細胞癌株Hep3B腫瘍塊中では活発にreplicationを示したが、前立腺癌株PC3、子宮頚部癌株HeLa中ではreplicationを示さなかった。一方対照として用いた、組織特異性を示さない組換えHSV(hrR3)は全ての腫瘍塊中でreplicationを示した。また、ヌードマウスに作成したHep3B腫瘍塊にG92Aを投与すると、著名な腫瘍退縮効果を認めた。また、マウス肝内に直接野性株HSVを投与すると、そのマウスは死亡したが、G92Aをその100倍量投与しても、何ら毒性を発揮しなかった。
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