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研究目的:Tumor angiogenesisを調節するVEGFは固形腫瘍の成長に不可欠である。本研究はgliomaの血管変化に注目し、VEGFのantisenseを発現させて血管変化を阻害し、腫瘍増殖進展を抑制する治療方法の開発を目的とした。
1:抗VEGFモノクロナール抗体を用いた免疫組織化学染色ではglioblastomaの血管周囲細胞及び壊死層周辺細胞にVEGFの陽性率が高かった。その他の腫瘍(良性も含む)でも陽性を示したが悪性度の高い程、陽性率は増加する傾向が見られた。
2:ヒトglioma培養細胞株からRT-PCRにてヒトVEGF cDNAを得た。得られたcDNAはVEGF165であることを塩基配列を検索し確認した。
3:antisense VEGFを発現させるためにVEGF165 cDNAをEBV発現vector pCEP4に組み込み、培養細胞に導入(cCEP4 antisense VEGF細胞)した後、control(pCEP4 alone細胞、正常細胞)と形態学的及び成長曲線で比較した。形態学的には3者に差はなく、成長曲線ではpCEP4 antiense VEGF細胞で成長が遅れる傾向があった。
しかしながらpCEP4 antisense VEGF細胞でVEGF発現が抑制されていることを未だ確認していない。今後は更にVEGFの発現抑制を分子生物学的に検索し、またin vivoでの研究を進める予定である。
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