| 研究概要 |
ラット褐色細胞腫の細胞株であるPC12を用い、これに腫瘍遺伝子であるKirsten-rasoncogeneをレトロウィルス感染により導入すると、同細胞がNGFの存在下で示すのと同様な神経細胞様の分化が起こることをまずin vitroにおいて確認した。即ち、細胞分裂の停止、神経様突起の伸展、神経伝達物質の産生を示すことを確認した。また、神経伝達物質の含有量および酸素活性を、生化学的にras導入PC12細胞(ras)、非導入PC12細胞(neive)およびNGF添加PC12細胞(NGF)の3者間で比較した。その結果、コリンアセチルトランスフェラーゼ(CHAT)活性はrasではnaiveの1.8倍でNGFのそれよりやや高い値を呈した。アセチルコリンエステラーゼ(AChE)活性はrasは2.2倍naiveより高くNGFのそれよりはやや低い値を呈した。それに対しコリン取り込みはnaiveとrasで変化はなかった。チロシンハイドロキシラーゼ活性はra, NGFともnaiveの約2.8倍高値を示した。ドパミン含有量はras, NGFともnaiveより各々30%,50%減少していた。これらの知見は、rasの導入がPC12細胞に形態的な神経細胞様変化をもたらすのみならず神経伝達物質の代謝活性の変化も伴っていることを示した。即ち、コリン作動性神経伝達物質およびカテコラミン作動性神経伝達物質を産生する移植のドナーとなり得ることを示唆した。以上の結果をもとに上述の細胞をラットの脳内に移植する予定である。
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