| 研究課題/領域番号 |
07671744
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
泌尿器科学
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| 研究機関 | 横浜市立大学 |
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研究代表者 |
野口 和美 横浜市立大学, 医学部, 助教授 (10164675)
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| 研究分担者 |
穂坂 正彦 横浜市立大学, 医学部, 教授 (30106330)
武田 光正 横浜市立大学, 医学部, 講師 (70244499)
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| 研究期間 (年度) |
1995 – 1997
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| キーワード | ゴナドトロピン / アンドロゲン / フィードバック調節 / Positive Control |
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| 研究概要 |
ラット下垂体前葉細胞を用い、抗gonadotropinβ一subunit抗体を用いたchamber cell immunoblot assay(CIBA)を確立した。下垂体単一細胞からのFSH分泌におよぼすアンドロゲンの影響を観察した。テストステロンの添加によりFSH分泌細胞の単一細胞あたりの分泌量は有意に増加したが、FSH分泌細胞の数は変化しなかった。分泌量による度数分布ではテスステロン添加によりFSH大量分泌細胞の増加が特徴的であった。単一細胞あたりのLH分泌量およびLH分泌細胞数はアンドロゲン投与により変化しなかった。以上、単一細胞レベルでアンドロゲンのFSH分泌に対する正のフィードバックを証明した。
ラット下垂体前葉細胞をテストステロン添加群と非添加群とに分けて培養した。テストステロンを十分に洗浄除去した後、10nM LH-RH(luteinizing hormone-releasing hormone)を6時間作用させてゴナドトロピン分泌細胞よりLHを放出させた。テストステロン投与によりimmunoreactive LHの放出は有意に抑制された。すなわち負のフィードバックが認められた。一方成熟マウス精巣よりライディッヒ細胞を分離し、下垂体前葉の培養細胞より得たそれぞれのLH溶液をこのライディッヒ細胞浮遊液に添加した。3時間で分泌されるテストステロンをRIAにて定量し、LHの生物活性(bioactivity)を測定した。テストステロン添加下垂体前葉細胞より得られたLHによって、ライディッヒ細胞からのテストステロンの分泌量は、テストステロン非添加の下垂体前葉細胞より得られたLHによるテストステロン分泌量よりも有意に増加した。すなわちテストステロン存在下で下垂体前葉細胞を培養すると生物活性の高い(B/I ratioの高い)LHが生成されることが明かとなった。
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