| 研究概要 |
単核球活性因子を加えたマウス腹腔マクロファージ(Mφ)ならびに培養上清によるマウス初期胚(in vivo embryo)の共培養
(1)BDF1マウス♀(8W)の腹腔をRPMI1640培地5mlにて洗浄して腹腔Mφを回収し、1.0×10^6/mlに調節して4well dishに移し、37℃,5%CO_2,in airの条件下で1時間培養付着させ、これに0.3%BSAを含んだHTFを加え、37℃,5%CO_2,in airの条件下で各々1,5,7日間の培養したものをMφとその培養上清単独あるいは両者を過排卵処理して交配して得たマウスin vivo前核期胚と共培養し、胚発育に及ぼす影響を検討した。Mφ前培養期間に関わらず胚発育が促進された。腹腔Mφの培養上清のみの培養でも、control群と比べていずれも胚発育が促進されたが、Mφ単独と上清での培養に比べると胚発育率は劣っていた。
(2)ICRマウス♀(8W)にて生理食塩水,recombinant human M-CSF(rhM-CSF)およびsizofiran100μgをin vivo投与し(1)と同様にMφをdishに付着させ0.3%BSAを含んだHTFを加え、マウスin vivo前核期胚と共培養し検討した。高濃度rhM-CSFをin vivo投与したとき生理食塩水投与の腹腔Mφとの共培養と比べてマウス胚発育率は有意に上昇した。
(3)ICRマウス♀(8W)にて(1)と同様にMφをdishに付着させ0.3%BSAを含んだHTFを加え、rhM-CSFおよびsizofiran100μgを添加し、マウスin vivo前核期胚と共培養し検討した。高濃度rhM-CSFを添加したとき無処理の腹腔Mφとの共培養と比べてマウス胚発育率は有意に上昇した。この腹腔Mφの培養上清中のサイトカインを測定したところIL-1β,IL-6,GM-CSFが検出されたが、このサイトカインの胚発育に及ぼす影響は現在検討中である。
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