| 研究概要 |
本研究では、強い制癌活性を有し、有望な経口白金剤の一つとして開発研究を進めているtrans, cis, cis-bis (n-butyrato) (1R, 2R-cyclohexanediamine) (oxalato) platinum (IV) (C4-OHP)とtrans,cis, cis-bis (n-valerato) (1R, 2R-cyclohexanediamine) (oxalato) platinum (IV) (C5-OHP)について、先ず、経口投与での制癌効果を評価した。担癌マウスにC4-OHP又はC5-OHPを経口投与し、生存日数から制癌効果を評価した。C4-OHPではコントロール群に比べ有意な生存日数の延長は認められなかったが、C5-OHPでは有意な延長が観察され、C5-OHPが確かに経口投与で制癌作用を示すことが明らかになった。以下、C5-OHPを主な対象とした。次いで、C5-OHPについてその高感度HPLC分析法を研究した。試料からC5-OHPを酢酸エチルで抽出した後、HPLCに適用した。HPLCでは、分離カラムにODSカラム、溶離液に水/メタノールを用いた逆相分配系で分離溶出し、210nmで直接紫外吸収検出することにより高感度にC5-OHPを定量できた。検出下限は50nMと高感度であり、血漿、尿、細胞の何れの試料についても分析が可能であった。更に、活性代謝物の検索を行い、活性代謝物についても高感度HPLC分析法を開発した。先ずグラジエント溶出HPLCを用いて活性代謝物を検索した結果, (1R, 2R-cyclohexanediamine) (oxalato) platinum (II) (OHP)が同定され、in vitroでは定量的に生成することが分かった。そこで、OHPの高感度HPLC分析法を研究した。OHPは逆相分配系で分離溶出後、ポストカラムで亜硫酸水素ナトリウムと反応させて誘導化し,290nmで紫外吸収検出することにより、高感度に定量できた。検出下限は50nMと高感度で,限外ろ過による除タンパクだけで血漿、尿及び細胞の何れの試料についても分析が可能であった。
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