組み換えに依存するDNA複製の機構とその生物学的意義の分子生物学的研究

1995 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07680675
• 研究種目: 一般研究(C)
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 正井 久雄 東京大学, 医科学研究所, 助教授 (40229349)
• キーワード: DNA複製 / DNA組み換え / 組み換え依存性修復 / DNAヘソカ-ゼ / D-ループ / Rループ / 適応的変異 / 二重鎖DNA切断

研究概要

(1)ATP結合ドメイン,あるいはZinc finger領域のシステインに点変異を持つ変異PriAタンパク質を作製した.
(2)これらの変異PriAタンパク質の安定DNA複製における機能を測定した結果,ATP結合能およびZinc finger様構造はともに安定DNA複製に必要であるという予備的な結果を得た.
(3)PriAタンパク質は,ColE1型プラスミドの複製起点近傍に形成されるR-loop構造に結合する.
(4)PriAタンパク質のN端300アミノ酸のみでn'pasと呼ばれる特異的なDNAヘアピン結合には十分である.

研究成果

• [文献書誌] Masai,H.& Arai,K.: "DnaA-dependent assembly of the ABC primosome at the A site,a single-stranded DNA hairpin containny a duaA-box" Eur.J.Biochem.230. 384-395 (1995)
• [文献書誌] Masai,H.et al.: "hskit,a S chizosaccharomyces pombe gene related to Saccharomyces cerevisiae CDC7,is regained for DNA replication" EMBO J.14. 3094-3104 (1995)
• [文献書誌] 正井久雄: "組み換えに依存したDNA複製の機構と生物学的意義" 実験医学増刊. 13. 1271-1277 (1995)
• [文献書誌] Masai,H.& Arai,K.: "DnaA-and PriA-dependent primosomoes:two destinct replication complexes for replication of Eschericlna coli diromosome" Frontiers in Bioscience. 1. 49-58 (1996)