GM-CSFの細胞内情報伝達機構

1995 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07770858
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 花園 豊 東京大学, 医学部(病), 助手 (70251246)
• キーワード: 造血因子 / 情報伝達 / リン酸化 / 受容体 / 白血病 / 癌遺伝子

研究概要

GM-CSFの細胞内情報伝達機構を解明するため、GM-CSF受容体のリン酸化からRasの活性化に至るまでの情報伝達経路の解析を行った。Rasの活性化にVavが関与していること、guanine nucleotide exchange factorであるVavは造血細胞に特異的に発現していることにより、本研究ではVavのGM-CSF情報伝達系における役割に注目した。
ヒト白血病細胞株UT-7においてGM-CSF刺激を行うと、刺激後1分以内にVavのチロシンリン酸化が観察された。さらにVavとアダプター分子であるGrb2/Ashとの関連を検討した結果、GM-CSFの刺激の有無に関わらずVavとGrb2/Ashが共沈した。この結合はGrb2/AshのSH3ドメインを介することを明らかとなった。
以上の結果より、GM-CSF刺激によりGrb2/Ash-Vav-Rasの経路の活性化が明らかとなった。さらに新たな情報伝達分子であるc-cblに注目して同様の実験を行った。その結果、UT-7細胞においてGM-CSF刺激によりc-cblのチロシンリン酸化が観察された。またGM-CSFの刺激に関わらずGrb2/Ashとc-cblが共沈した。この結合はGrb2/AshのSH3ドメインを介することが明らかとなった。c-cblのRasの活性化への関与は明らかではないことより、c-cblはVavとは異なる経路において情報伝達に関与している可能性が示唆された。またGrb2/Ashは以上2つの経路においてアダプター分子としての役割をはたしてることも明らかとなった。

研究成果

• [文献書誌] Hanazono, Y.: "Erythropoietin induces tyrosine phosphorylation of the β chain of the GM-CSF receptor" Biochem. Biophys. Res. Commun.208. 1060-1066 (1995)
• [文献書誌] Hanazono, Y.: "Tyrosine phosphorylation of the proto-oncogene prodect Vav and its association with the adapter Grb2/Ash in a human leukemia cell line UT-7" Jpn. J. Cancer Res.86. 336-341 (1995)
• [文献書誌] Odai, H.: "The proto-oncogene prodect c-cbl becomes tyrosine phosphorylated by stimulation with GM-CSF of Epo and constitutively binds to the SH3 domani of Grb2/Ash in human nematopoietic cells" J. Biol. Chem.270. 10800-10805 (1995)
• [文献書誌] Sasaki, K.: "Tpo/c-mpl ligand induces tyrosine phosphorylation of multiple cellular proteins including proto-oncogene products, van and c-cbl, and ras signaling molecules" Boichem. Biophys. Res. Commun.216. 338-347 (1995)
• [文献書誌] Odai, H.: "c-cbl is inducibly tyrosine-phosphorylated by epidermal growth factor stimulation in fibroblasts, and constitutively tyrosine-phosphorylated and associated with v-src in v-src-transformed fibroblasts" Jpn. J. Cancer Res.86. 1119-1126 (1995)