膜アンカー型細胞増殖因子の変換機構の解析

1995 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07780513
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 東山 繁樹 大阪大学, 医学部, 助手 (60202272)
• キーワード: HB-EGF / セレクターゼ / ジャクスタクリン活性 / PKC

研究概要

モンキー腎上皮由来Vero細胞にヒトproHB-EGFを発現した細胞株VeroH細胞を作成し、proHB-EGFのプロセッシングを免疫沈降法およびFACS分析により解析した。その結果、proHB-EGFの大部分は約1.5時間の半減期で細胞内に取り込まれ分解された。しかし、ホルボールエステル等によりC-キナーゼを活性化すると、proHB-EGFや約7分の半減期で分泌型HB-EGFへと効率よく変換された。このことは、HB-EGFのジャクスタクリン活性からパラクリン活性への変換がC-キナーゼを介する系路により制御されていることを示唆している。一方、CHO細胞に発現したヒト型proHB-EGFとマウス型proHB-EGFのジャクスタクリン活性に顕著な差異を見い出し、その原因をヒトーマウスキメラproHB-EGFを用いて解析した。その結果、proHB-EGFのN-末端プロセッシングがジャクスタクリン活性の発現に極めて重要であることを明らかにするとともに、このプロセッシングの担い手がエンドプロテアーゼの1つ、furinであることを示唆した
以上、本研究によりproHB-EGFのジャクスタクリン活性はエンドプロテアーゼ、furinによる末端プロセッシング及びC-キナーゼ系路を介するC-末端プロセッシングにより制御されていることを明らかにした。

研究成果

• [文献書誌] Higashiyama S.: "The membrane protein CD9/DRAP27 potentiates the juxtacrine growth factor activity of the membrane-anchored heparin-binding EGF-like growth factor." J.Cell Biol.128. 929-938 (1995)
• [文献書誌] Goishi K.: "Phorbol ester induces the rapid processing of cell surface heparin-binding EGF-like growth factor:conversion from juxtacrine to paracrine growth factor activity." Mol.Biol.Cell. 6. 967-980 (1995)
• [文献書誌] Kiso S.: "Role of heparin-binding EGF-like growth factor(HB-EGF)as a hepatotrophic factor in rat liver regeneration following partial hepatectomy." Hepatology. 22. 2584-2590 (1995)
• [文献書誌] Murayama Y.: "Localization of Heparin-binding epidermal growth factor-like Growth Factor(HB-EGF)in human gastric mucosa." Gastroenterology. 109. 1051-1059 (1995)
• [文献書誌] Fukuda K.: "Increased mitogenic response to heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor in vascular smooth muscle cells of diabetic rats." Arterio.Thrombo.and Vascular Biol.15. 1680-1687 (1995)
• [文献書誌] Shishido,Y.: "Heparin-like molecules on the cell surface potentiate binding of diphtheria toxin to the diphtheria toxin receptor/membrane-anchored heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor." J.Biol.Chem.270. 29578-29585 (1995)