単純ヘルペスウイルスのヒトインターフェロン耐性遺伝子の解析

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07807037
• 研究機関: 国立予防衛生研究所
• 研究代表者: 荒尾 雄二郎 国立予防衛生研究所, 感染病理部, 主任研究官 (40151146)
• 研究分担者: 安藤 靖恭 慶応大学, 医学部眼科学教室, 助手 (90193119) ; 岩崎 琢也 国立予防衛生研究所, 感染病理部, 室長 (90146027)
• キーワード: 単純ヘルペスウイルス1型 / 単純ヘルペスウイルス2型 / α型ヒトインターフェロン / β型ヒトインターフェロン / γ型ヒトインターフェロン / インターフェロン抵抗性 / 型間組換えウイルス / マーカーレスキュー

研究概要

IFNに高感受性を有するHSV-1、HSV-2両株より得たIFN耐性回復型間組換えHSV株の分析から、HSV-2のIFN感受性変異は、HSV-2ゲノムのBamHI-A、E断片またはBglII-I、N断片のいずれかに存在すると考えられた。これらのDNA断片を、IFN耐性HSV-2株よりクローン化し、IFN高感受性HSV-2株の全ゲノムとco-transfectionしたところ、co-transfection直後の子孫ウイルスのプラーク形成効率はBglII-N断片を用いた場合が比較的高いものの、陰性標準や他のクローン化DNA断片を用いた場合と比べ、大きな差ではなかった。そこで、これら子孫ウイルスをIFN処理細胞で継代したところ、BglII-N断片を用いて生じた子孫ウイルスでのみ、子孫ウイルスのプラーク形成効率の明らかな上昇認められた。HSV-2・BglII-N断片にIFN耐性遺伝子があることを確認するために、プラーク形成効率の上昇した子孫ウイルスから単離したIFN耐性ウイルスクローン、IFN感受性HSV-2親株、及びIFN耐性HSV-2親株からBglII-N内の塩基配列をPCRで増幅し、制限酵素切断分析によって比較検討した。その結果、そのIFN耐性ウイルスクローンは、IFN感受性HSV-2株でではなくIFN耐性HSV-2株の塩基配列を有しており、BglII-N断片上にHSV-2のIFN耐性遺伝領域が存在することが確認された。

研究成果

• [文献書誌] Y Arao,Y Ando,M Narita and T Kurata: "A similar sensitivity of herpes simplex virus infection to type I and II interferonns" Journal of Interferon and Cytokine Research. (in press).
• [文献書誌] Y Ando,T Iwasaki,T Sata,S Soushi,T Kurata,Y Arao: "Enhanced cytopathic effect of human cytomegalovirus on a retinal pigment epithelial cell line,K-1034,by serum-free medium" Archives of Virology. (in press).
• [文献書誌] J Padilla,M Yamada,Y Takahashi,T Tsukazaki,J Nasamura,M Yoshida,F Uno,Y Arao,S Nii: "In Vitro selection of variants of herpes simplex virus type 1 which differ in cytopathic changes" Microbiology and Immunology. (in press).
• [文献書誌] 山口優樹、荒尾雄二郎、倉田毅、栗村敬、川名尚、山西弘一、森島恒雄、本田まりこ、新村眞人、本藤良、吉田正己: "DNA診断による単純ヘルペスウイルスの型判定" 臨床とウイルス. 24. 63-68 (1996)
• [文献書誌] 荒尾雄二郎: "Molecular Medicine" 単純ヘルペスウイルス潜伏感染化の制御因子, 1444-1445 (1996)
• [文献書誌] 荒尾雄二郎、新居志郎: "医学のあゆみ" 単純ヘルペスウイルスの持続感染成立機構, 857-863 (1996)