胸腺発がんのリスク因子としてのマクロファージの加齢変化;年齢依存性と遺伝的要因

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07807048
• 研究機関: 放射線医学総合研究所
• 研究代表者: 島田 義也 放射線医学総合研究所, 第5研究グループ, 研究員 (10201550)
• 研究分担者: 柿沼 志津子 放射線医学総合研究所, 第5研究グループ, 客員研究員
• キーワード: 胸腺リンパ腫 / 老化 / マクロファージ

研究概要

癌の発生率は、遺伝的要因や年齢要因などの生物学的要因に大きく依存している。本研究は、発がん感受性の年齢依存性を発がんの標的細胞の年齢変化および発がんの微少環境をつくるマクロファージの機能変化の面から検討することにある。昨年度までに、(1)B6C3F1マウスにX線によって胸腺リンパ腫を発生させるとその発生率は6ヶ月齢のマウスで17%、2ヶ月齢のマウスで80%であり、被ばく時月齢が高くなるにつれ、その発がんリスクは小さくなることを明かにし、(2)今後の研究解析のための、サザンブロット法、PCR-RFLP法などの基礎的な分子生物学的技術の導入をはかった。
本年度は、さらに、PCR-SSCP法、RT-PCR法ならびに免疫組織化学法の導入を行なった。まず、これらの技術を用いて、2ヶ月齢マウスに誘発した胸腺リンパ腫のゲノム変異をまず解析し、化学発がん剤誘発リンパ腫に比べ、X線誘発胸腺リンパ腫は、(1)K-rasならびにN-ras遺伝子の突然変異の変異スペクトルが広いこと、(2)ゲノムのLOH(loss of heterozygosity)の頻度が高いこと、さらに(3)新規がん抑制遺伝子が11番染色体にあることを示唆するデータを得た。また、照射後の胸腺内環境の指標となるマクロファージが産生する各種成長因子(IGR、IGFBP)、サイトカイン(IL1、IL2、IL4、IL7、TNFα、GM-CSF、SCF)のRT-PCRの条件を検討し、最適条件を決定した。現在、2ヶ月齢、6ヶ月齢のマウスにX線を照射した後、継時的に胸腺細胞ならびに胸腺内ストローマ細胞を分離し、RNAを抽出し、cDNAを作成している。今後、これらの分子の発現の継時変化を逐次明かにしていく予定である。

研究成果

• [文献書誌] Kobayashi,S.: "Increased sensitivity of scid heterozygous mice to ionizing radiation." Int.J.Radiat.Biol.72. 537-545 (1997)
• [文献書誌] Takahashi,T.: "Suppression of autoimmune disease and massive lymphadenopathy in MRL/MP-lpr/lpr mice lacking tyrosine kinase fyn." J.Immunol.159. 2532-2541 (1997)
• [文献書誌] Shimada,Y.: "Heterogeneouse aging of macrophage-lineage cells in the capacity for TNF production and self renewal in C57BL/6 mice." Mechanisms of Ageing and Development. 87. 183-195 (1996)
• [文献書誌] Kubota,Y.: "Reduced fidelitty of DNA synthesis in cell extracts from chemically induced primary thymic lymphomas of mice." Cancer Res.55. 3777-3780 (1995)
• [文献書誌] Higashimoto,Y.: "Influence of age on mouse alveolar macrophage functions." Jpn.J.Respiration. 14. 547-552 (1995)
• [文献書誌] 島田義也: "放射線によるゲノム損傷から発がんの直線仮説を考える" RADIOISOTOPES. (1998)