| 研究概要 |
1.WT1発現ベクターの作成
WT1蛋白の機能を抑制することによって,脱分化及び癌化した細胞を分化誘導することを目的として各種のWT1発現ベクターを作成した。すなわち,WT1蛋白のZnフィンガードメインのみを発現するもの,全長WT1蛋白を発現するもの,WT1蛋白の認識するDNA結合部位などを発現するものなど既に作成した。現在,これらの発現ベクターを血液細胞株,上皮系癌細胞株に遺伝子導入している。
2.WT1遺伝子の構造異常,発現異常の検索
急性骨髄性白血病などの臨床患者より得られた材料においてRT-PCR法を用いて既に正常とは異なるサイズのmRNA発現があることを見いだした。現在この構造異常について塩基配列の決定など詳細な解析を行っているところである。
3.WT1蛋白の調節機構の解析
WT1蛋白自身の調節機構を把握する目的でWT1レコンビナント蛋白(GST-融合蛋白)を既に作成した。これをウェスタンブロット法を用いて確認しており,現在はこの蛋白と結合する新しい蛋白の同定をウエストーウェスタンブロット法を応用して行っているところである。
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