ヒト歯周病原性Eubacteriumの新菌種の遺伝学的同定と免疫学的性状の解析

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07807166
• 研究機関: 新潟大学
• 研究代表者: 中澤 太 新潟大学, 歯学部, 講師 (60115053)
• 研究分担者: 吉江 弘正 新潟大学, 歯学部, 助教授 (20143787) ; 星野 悦郎 新潟大学, 歯学部, 教授 (90124619)
• キーワード: Oral Eubacterium / New species / SDS-PAGE / DAN-hybridization / GC% / DNA-homology

研究概要

本研究では、新しいタイプのEubacterium属細菌種について、既に確立している菌種との遺伝・免疫学的な相違を明らかにすることによって、New Eubacterium speciesを提唱することを主たる目的としている。これまで我々は、ヒト口腔由来の未同定Eubacterium属細菌を幾つか分離・保存していたが、その内、本研究では糖非分解性Eubacteriumに焦点を絞り、その性状を、既に確立している標準株のそれと比較検討した。その結果、検討した菌株中には、形態学的性状、一般生化学性状、API ZYMによる酵素活性、SDS-PAGEによる構成蛋白質Western-blottingによる血清学的性状のいずれにおいても、既存の糖非分解性Eubacterium属細菌種とは異なる菌種が数種類含まれることが判明した。近年の細菌分類学において、new speciesの提案のためには、前記の性状の他にDNA-DNAホモロジーや16S rRNAシークエンス等の解析は不可欠とされることから、それらの遺伝学的性状についても明らかにした。その結果、G+C contentは38-61%であった。また、DNA-DNA hybridizationの結果、他の糖非分解性Eubacterium属細菌種には、10%以下の著しく低い相同性を示した。以上の結果から、従来の細菌種とは全く異なる新しい菌種を5種発見し、その内2種にE.minutum,E.exgiguumと命名し、I.J.S.Bに報告した。また他3種についても命名後報告する準備を整えている。更に、本研究の過程で新しい口腔Trponemaも同定し、T.mediumとし報告した。

研究成果

• [文献書誌] 中澤 太、他: "細菌の細菌分類" 新潟菌学会誌(Niigata Dental Journal).25・1. 61-62 (1995)
• [文献書誌] F.Nakazawa et al: "Eubacterium minutum sp.nov.,Isolated from Human Periodontal Pockets" International Journal of Systematic Bacteriology.46・1. 31-34 (1996)
• [文献書誌] F.Nakazawa et al: "Eubacterium exiguum sp.nov.,isolated from human oral lesions" International Journal of Systematic Bacteriology.46・4. 1120-1124 (1996)
• [文献書誌] F.Nakazawa et al: "Treponema medium sp.nov.,isolated from Human subgingival Dental plaque." International Journal of Systematic Bacteriology.47・1. 67-72 (1997)
• [文献書誌] F.Nakazawa et al: "Genetic characterization of a oral treponemaisolated from human subgingival plaque." Oral Microbiology and Immunology. (印刷中).
• [文献書誌] F.Nakazawa et al: "Separation and deletion of Porphyromonas gingivalis with immunomagneticbeads." Japanese Journal of Oral Biology. (印刷中).
• [文献書誌] F.Nakazawa et al: "Medical and Dental Aspects of Anaerobes" B.I.Duerden,W.G.Wade,J.S.Brazier,A.Eley, 5 (1996)