Ras蛋白質と相同性を持つシスタチンの発がん活性の検索

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07808084
• 研究機関: 千葉県がんセンター
• 研究代表者: 日和佐 隆樹 千葉県がんセンター, 研究局・生化学研究部, 研究員 (30260251)
• キーワード: ras / プロテアーゼ / 形質転換

研究概要

昨年までの研究においてrasがん遺伝子産物(Ras)、およびシスタチンはシステイン・プロテアーゼを特異的に阻害し、この阻害活性が発がんの初期の過程をGTP-非依存的に促進することを確認した。しかしながらこれまでのところどのようなシステイン・プロテアーゼが発がんに対して抑制的に働いているか明らかでない。その中で最近注目されているinterleukin 1β-converting enzyme(ICE、caspase)ファミリーはシステイン・プロテアーゼに属し、アポトーシスを誘導すると報告されている。そこでこのファミリーに属しているICE、CPP32、およびICH-1の遺伝子を真核細胞の発現ベクターに組み込み、NIH3T3、またはHa-ras-NIH3T3細胞に導入して発現を誘導した。NIH3T3のトランスフェクト細胞はこれらの遺伝子の発現を誘導しても特に変化は観察されなかった。従ってNIH3T3細胞ではICEファミリープロテアーゼの発現のみではアポトーシスを誘導できないと考えられた。一方、Ha-ras-NIH3T3細胞においてはICEやCPP32の発現では特に変化は見られなかったが、ICH-1を発現すると顕著な形態変化が観察され、正常細胞のような偏平な細胞が出現した。この形態的正常復帰はICH-1の発現レベルに相関し、同時にRas蛋白質の減少も見られた。in vitroで細胞抽出液を加温するとRas蛋白質が一部分解するが、それはICEインヒビターで抑制された。これらのことからRasとICH-1の相互作用が発がんに影響を与えると推定された。

研究成果

• [文献書誌] Takaki Hiwasa et al.: "Synergistic induction of anchorage-independent growth of NIH3T3 mouse fibroblasts by cysteine proteinase inhibitors and a tumor promoter." J.Biol.Chem.271. 9181-9184 (1996)
• [文献書誌] Takaki Hiwasa et al.: "Enhancement of catalytic activities of serine proteases by tripeptide compounds." FEBS Lett.,. 386. 47-50 (1996)
• [文献書誌] Takaki Hiwasa et al.: "Enhancement of anti-proliferative activities of 5-FU,HCFU,SN-38,THP and ACNU by a serine protease inhibitor,FOY-305." Int.J.Oncol.9. 517-520 (1996)
• [文献書誌] Takaki Hiwasa et al.: "Induction of apoptosis by a calpain stimulator,ONO-3403." Apoptosis. 1. 75-80 (1996)
• [文献書誌] Takaki Hiwasa et al.: "Loss of Raf-1 binding activity of v-Ha-Ras by the delection of amino acid residues 64-72 and 143-151." Cell Signal.8. 393-396 (1996)
• [文献書誌] Takaki Hisawa et al.: "Differential chemosensitivity in oncogene-transformed cells." J.Exper.Therap.Oncol.1. 162-170 (1996)