raftはスフィンゴ脂質やコレステロールを主成分とする細胞膜上のマイクロドメインで、リンパ球のシグナル伝達の場として機能する。我々はこれまでに、ヒトB細胞株(Raji)のraft画分を用いたプロテオーム解析により、新規分子Raftlinを同定し、Raftlinがraftの形成又は維持に必要であり、B細胞受容体(BCR)の至適なシグナル伝達に重要であることを示した。 今回、個体での機能を解明するため、Raftlin遺伝子欠損マウス(KOマウス)を作製した。KOマウスはメンデルの法則に従って誕生し、外見上に顕著な異常は認められなかった。Raftlinは正常マウスの脾臓及び胸腺で強い発現が認められることから、KOマウスの免疫細胞(B細胞、T細胞、樹状細胞)を中心に解析を行なった。胸腺でのT細胞の発達や骨髄、末梢でのB細胞の分布は異常ないものの、KOマウスの脾臓は野生型(WTマウス)に比べ小さく、T細胞、B細胞ともに細胞数が減少していた。最初に、TNP-Ficoll、DNP-KLH/Alum、DNP-KLH/CFAを抗原として免疫したところ、DNP-KLH/CFAで免疫した場合のみ抗原特異的抗体産生能が有意に減少していた。そこで、B細胞及びT細胞のBCR/TCR刺激による応答をin vitroで解析した結果、TCR刺激による細胞内蛋白質のチロシンリン酸化とIL17を含むサイトカインの産生が低下していた。一方、樹状細胞におけるLPSや結核死菌に対する応答を調べたところ、炎症性サイトカインの産生が減弱していた。そこで樹状細胞のWTマウスへの移入実験を行ったところ、特にIL17産生誘導能がKO樹状細胞で減弱していることが明らかになった。近年、自己免疫疾患である多発性硬化症へのIL17を産生するTh17細胞の関与が報告されているため、その実験モデルであるEAEを行ったところ、KOマウスで病態の軽減が観察された。 以上のことより、樹状細胞とT細胞のどちらにおいてRaftlinが欠損してもT細胞のTh17への分化が抑制されることが明らかとなったため、その分子機構について現在検討中である。
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