• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 課題ページに戻る

1996 年度 実績報告書

転写装置の分子解剖

研究課題

研究課題/領域番号 08044107
研究機関国立遺伝学研究所

研究代表者

石浜 明  国立遺伝学研究所, 分子遺伝研究系, 教授 (80019869)

研究分担者 藤田 信之  国立遺伝学研究所, 分子遺伝研究系, 助手 (90173434)
BUSBY Stephe  Univ. Birmingham, Sch. Biochem., Reader
HAYWARD Rich  Univ. Edinburgh, Inst. Cell Mol. Biol., Senior Lec
GLASS Robert  Univ. Nottingham, Dept. Biochem., Professor
キーワードRNAポリメラーゼ / 転写因子 / DNA-蛋白質相互作用 / 蛋白質-蛋白質相互作用 / 分子集合 / 構造-機能相関 / 大腸菌 / 転写制御
研究概要

遺伝子発現は、多種多様の転写調節因子がRNAポリメラーゼに作用し、その特異性(遺伝子認識選択特性)を変化させて、転写対象の遺伝子が変わることによって、制御されている様相が、最近明らかにされた。本研究は、大腸菌RNAポリメラーゼを対象とし、大腸菌の存在すると予想される、約100種類の転写因子との接点を、4種のサブユニット上に同定し、さらに、転写因子との接触による、RNAポリメラーゼの機能特異性変換の機構を解明する目的で実施された。幸いRNAポリメラーゼの主要な研究者は、日本と連合王国に集中するので、大腸菌RNAポリメラーゼの各サブユニット毎に分担を決めて分子解剖を実施した。
研究は、先ず、大腸菌RNAポリメラーゼの変異体コレクションを作製し、日英両国のみならず、世界各国の転写因子研究の専門家の協力を得て転写因子の供与をうけ、それぞれの転写因子の作用を受け付けなくなったRNAポリメラーゼ変異体を単離した。RNAポリメラーゼ上の変異の位置をDNA塩基配列から決定し、転写因子接点を推定した。遺伝解析から推定した接点を実証する目的で、さらに、RNAポリメラーゼと転写因子の接触を、直接に物理化学的、生化学的方法で解析した。約100種の転写因子の内、約30種については、接触するサブユニットを推定し、その内数種類については、アミノ酸配列の上で、接点を同定した。本共同研究によって、転写制御の分子機構の研究に、新たな突破口を切り開くことが出来た。

  • 研究成果

    (19件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (19件)

  • [文献書誌] Artsimovitch,I.: "Transcription activation by the bacteriophage Mu Mor protein requires the C-terminal regions of both α and σ^<70> subunits of Escherichia coli RNA polymerase." J.Biol.Chem.271. 32343-32348 (1996)

  • [文献書誌] Belyaeva,T.: "Location of the C-terminal domain of the RNA polymerase alpha subunit in diggerent open complexes at the Escherichia coli galactose operon regulatory region." Nucleic Acids Res.24・12. 2243-2251 (1996)

  • [文献書誌] Eichenberger,P.: "The influence of the location of the activator binding site on the geometry of a transcriptional activation complex in Escherichia coli." Biochemistry. 35・48. 15302-15312 (1996)

  • [文献書誌] Giladi,H.: "Identification of an UP element within the IHF binding site at the P_L1-P_L2 tandem promoter of bacteriophase λ." J.Mol.Biol.260. 484-491 (1996)

  • [文献書誌] Imamura,R.: "Identification of the cdpA gene encoding cyclic 3',5'-adenosine phosophate phosphodiesterase in Escherichia coli." J.Biol.Chem.271・41. 25423-25429 (1996)

  • [文献書誌] Jair,K.-W.: "Ambidextrous transcription activation by Soxs : Requirement for the C-terminal domain of the RNA polymerase alpha subunit at a subset of superoxide inducible genes." Mol.Microbiol.19・2. 307-314 (1996)

  • [文献書誌] Jair,K.-W.: "Transcription activation of promoters of the superoxide and multiple antibiotic resistance regulation by Rob,a binding protein of the Escherichia coli origin of chromosomal replication." J.Bacteriol.178・9. 2507-2513 (1996)

  • [文献書誌] Jishage,M.: "Regulation of RNA polymerase sigma subunit synthesis in Escherichia coli : Intracellular levels of four species of sigma subunit under various growth conditons." J.Bacteriol.178・18. 5447-5451 (1996)

  • [文献書誌] Kimura,M.: "Subunit assembly in vivo of Escherichia coli RNA polymerase : Role of the amino-terminal assembly domain of alpha subunit." Genes to Cells. 1・6. 517-528 (1996)

  • [文献書誌] Kusano,S.: "Promoter selectivity of Escherichia coli RNA polymerase Eσ^<70> and Eσ^<38> holoenzymes : Effect of DNA supercoiling." J.Biol.Chem.271・4. 1998-2004 (1996)

  • [文献書誌] Luo,J.: "Molecular anatomy of the b' subunit of the E.coli RNA polymerase : Identification of regions involved in polymerase assembly" Genes to Cells. 1・9. 819-828 (1996)

  • [文献書誌] Murakami,K.: "Transcription factor recognition surface on the RNA polymerase α subunit is involved in contact with the DNA enhancer element." EMBOJ.15・16. 4358-4367 (1996)

  • [文献書誌] Rajkumari,K.: "Effects of H-HS and potassium glutamate on σ^S-and σ^<70>-directed transcription in vitro from osmotically regulated P1 and P2 promoters of proU in Escherichia coli." J.Bacteriol.178・14. 4176-4181 (1996)

  • [文献書誌] Tang,Y.: "Upstream interactions at the lambda ^PRM promoter are sequence-nonspecific and activate the promoter to a lesser extent than an introduced UP element of an rRNA promoter." J.Bacteriol.178・23. 6945-6951 (1996)

  • [文献書誌] Greiner,D.P.: "Synthesis of the protein cutting reagent iron (S)-1-(p-bromoacetamidebenzym) ethylenediaminetetraacetate and conjucation to cysteine side chains." Bioconjugate Chemistry. 8・1. 44-48 (1997)

  • [文献書誌] Jishage,M.: "Variation in RNA polymerase sigma subunit composition within different stocks Escherichia coli strain W3110." J.Bacteriol.179・3. 959-963 (1997)

  • [文献書誌] Kusano,S.: "Promoter selectivity control of Escherichia coli RNA polyerase Eσ^<38> holoenzyme by trehalose." J.Bacteriol.(in press).

  • [文献書誌] Murakami,K.: "The two alpha subunits of Escherichia coli RNA polymerase are asymmetrically arranged and contact different halves of the DNA UP element." Proc.Nat.Acad.Sci.(in press).

  • [文献書誌] Negre,D.: "DNA flexibility of the UP element is a major determinant for transcriptional activation at the Escherichia coli acetate promoter." Nucleic Acids Res.25・4. 713-718 (1997)

URL: 

公開日: 1999-03-08   更新日: 2016-04-21  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi