| 研究課題/領域番号 |
08044129
|
|---|
| 研究機関 | 東京工業大学 |
|---|
研究代表者 |
畑中 研一 東京工業大学, 生命理工学部, 助教授 (70167584)
|
|---|
| 研究分担者 |
PAN YuanーTse アーカンソー大学, 生化学分子生物学科, 助教授
ELBEIN Alan アーカンソー大学, 生化学分子生物学科, 主任教授
小林 雄一 東京工業大学, 生命理工学部, 助教授 (90153650)
|
|---|
| キーワード | 糖転移酵素 / ウリジン / 糖質高分子 / 酵素阻害 |
|---|
| 研究概要 |
酵素反応には、ガラクトシルトランスフェラーゼ(ラクトースシンターゼ)を用い、α-ラクトアルブミン存在下におけるUDP-ガラクトースからp-ニトロフェニルα-D-グルコピラノシドへのガラクトース残基の転移をHPLCを用いて定量した。
ウリジンを有するポリスチレンはガラクトシルトランスフェラーゼを阻害した。低分子量の競合阻害剤であるUDPやUMPと比較してかなり強い阻害作用(ドナー基質の1%の濃度で75%の阻害活性)であったが、阻害形態については不明である。多官能の高分子阻害剤であるためにデータにばらつきが生じたことが原因であろうと考えられる。強い阻害作用の主な要因としては、高分子阻害剤を用いたことによる高分子効果のため、見かけの結合定数が大きくなったためと考えられる。さらに、ウリジンとガラクトース(αおよびβ)を有する共重合体も同様の強い酵素阻害効果を示した。これに対して、ウリジンとα-D-グルコースを有する共重合体では阻害効果が極端に弱まることも発見した。この現象が単独重合体では見られないことから、ウリジンとα-D-グルコースを有する共重合体は特異的な立体構造をとり、ウリジン部分がポリマー鎖の内側に位置しているために起こった現象と推察される。一方、糖残基のみを有するポリスチレン誘導体では酵素阻害作用がまったくみられない。すなわち、本研究で用いた酵素は、基質である糖ヌクレオチドのウリジン部分に強く相互作用しているものと考えられる。
|
