牛ウイルス病原性の分子機構と分子疫学

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08044226
• 研究機関: (財)日本生物科学研究所
• 研究代表者: 山内 一也 財団法人日本生物科学研究所, 主任研究員 (30072888)
• 研究分担者: 小船 富美夫 国立予防衛生研究所, 主任研究員 (80142644) ; 布谷 鉄夫 財団法人日本生物科学研究所, 主任研究員 (80099994) ; 杉山 誠 岐阜大学, 農学部, 助手 (80196774) ; 鎌田 寛 日本大学, 農獣医学部, 講師 (30139050) ; 甲斐 知恵子 東京大学, 農学部, 助教授 (10167330) ; DIALLO Adama フランス熱帯獣医学研究所, 主任研究員 ; BARRETT Thom 英国家畜衛生研究所, 主任研究員
• キーワード: 牛疫ウイルス / 病原性 / 組換えワクチン / 細胞性免疫 / H蛋白 / NP蛋白

研究概要

発展途上国における家畜の最重要ウイルス疾患の原因である牛疫ウイルスについて病原性および免疫成立機構の研究を行った。
主な成果は以下の通りである。
1。牛疫ウイルスの病原性に関する研究
(1)ウサギの感染モデルについて本研究班で確立した、B95a細胞による力価測定法を応用して、ウイルス増殖の様式をウイルス感染価の面から解析した。その結果、リンパ組織全般にわたって急速なウイルス増殖が数日間起こり、ひきつづいてウイルスが急速に排除されている様式がみいだされた。
(2)牛の感染モデルについて、phytohemagglutinin刺激によるblast化を指標として免疫能を調べた結果、強毒ウイルス感染により、著しい免疫不全のひきおこされることが確認された。
2。組換え牛疫ウイルスによる免疫成立機構に関する研究
(1)H遺伝子を組み込んだワクチニアウイルスのm免疫効果
本組換えウイルスはすでに、牛における有効性、免疫持続性、安全性、遺伝的安定性が確認され、実際にワクチンとして使用可能であることが明らかにされている。このうち、免疫持続性について現在2年目の検討を行い、ウイルス中和抗体の持続を確認した。来年度はじめに強毒ウイルス攻撃による防御免疫の試験を行う予定になっている。
(2)NR遺伝子を組み込んだワクチニアウイルスの免疫効果
新たに作製したNP遺伝子を組み込んだワクチニアウイルスを用い、ウサギのモデルで免疫実験を行った結果、抗NP抗体の産生がみいだされ、免疫の成立が確認された。しかし、これらのウサギは抗体の存在にもかかわらず強毒ウイルスの攻撃により発病した。

研究成果

• [文献書誌] Kobune,F.,Kai,C.,Yamanouchi,K.,et al.: "Nonhuman primate models of measles" Lab.Anim.Sci.46. 315-320 (1996)
• [文献書誌] Sugiyama,M.,Yamanouchi,K.,et al.: "The nucleotide sequence of the hemagglutinin gene of the LA strain of rinderpest virus" J.Vet.Med.Sci.58. 769-771 (1996)
• [文献書誌] Kai,C.,Yamanouchi,K.Kobune,F.et al.: "Nucleotide sequences of prevailing wild measles viruses and a comparison with SSPE virus" Virus Genes. 12. 85-87 (1996)
• [文献書誌] Kai,C.et al.: "Epidemiological observations on recent outbreaks of canine distemper in Tokyo" J.Vet.Med.Sci.58. 547-550 (1996)
• [文献書誌] Kai,C.et al.: "Es Expression of the nucleocapsid protein gene of the canine distemper" J.Vet.Med.Sci.59. 51-53 (1997)
• [文献書誌] Kamata,H.et al.: "Construction and characterization of vaccinia virus expressing rinderpest virus NP Protein" Comp.Immunol.Microbil.Inf.Dis.(submitted).
• [文献書誌] Yamanouchi,K.: "New approaches for rinderpest vaccine" Elsevier, 5 (1997)