1997 年度実績報告書

立体配座制御活性型ビタミンDアナログの合成,受容体結合性、および遺伝子発現調節

研究課題

研究課題/領域番号	08044256
研究機関	東京医科歯科大学
研究代表者	山田幸子東京医科歯科大学, 医用器材研究所, 教授 (10014078)
研究分担者	DELUCA Hecto ウイスコンシン大学, 生化学, 教授山本恵子東京医科歯科大学, 医用器材研究所, 助手 (90147017) 清水正人東京医科歯科大学, 医用器材研究所, 助教授 (50126231)
キーワード	活性型ビタミンD / アナログ合成 / コンフォメーション解析 / フッ素化ビタミンD / フッ素NMR / ビタミンD受容体 / リガンド-受容体錯体 / 遺伝子組み替え
研究概要	前年度の研究で活性型ビタミンDおよびその20-エピアナログの側鎖の可能コンフォメーションを分子力学法を用いて解析し、ビタミンD側鎖の可動領域が、A、G、EA、EGの4つに分類できることを明らかにした。そして、配座制御アナログの合成と活性の検討結果から、ビタミンDアナログの受容体結合活性は側鎖領域で示すとEA>A>G>EGの順であることを明らかにした。今年度は、この活性空間領域のコンセプトを既知の高活性アナログに適応し、細胞分化誘導活性との関係を検討した。その結果、分化誘導活性の高くカルシウム作用の弱く、乾癬症の治療剤として開発されたアナログや、抗癌剤として開発中のアナログの側鎖が占める領域を見出し、F領域と命名した。この仮説を基に分化誘導活性の高くカルシウム作用の弱いアナログを設計合成した。 A環アナログとしては受容体との結合立体構造をNMRを用いて解析するためのプローブとなる、4-及び19-フッ素化ビタミンDアナログ(4F2-1,25(OH)2D3及び10(19)E-&Z-19F-1,25(OH)2D3)の合成に成功した。これらのNMR解析によりA環のコンフォメーションを19FNMRで容易にモニターできることが明らかになった。受容体-リガンド結合構造を解析するために不可欠なビタミンD受容体リガンド結合領域はアメリカグループの協力で遺伝子組み替え法により数10mgレベルでの合成に成功した。

研究成果

(13件)

すべてその他

すべて文献書誌 (13件)

[文献書誌] Masato Shimizu: "First Fluorometric Method for the Assay of Plasma 1α, 25-Dihydroxyvitamin D3" J. Fluorescence. 7. 235S-237S (1997)
[文献書誌] Masato Shimizu: "Fluorimetric Assay of 1α, 25-Dihydroxyvitamin D3 in Human Plasma" J. Chromatogr. B. 690. 15-23 (1997)
[文献書誌] Xinxiang Wang: "Multiple Fluorometric Assay of Three Major Vitamin D3 Metabolites (25-hydroxyvitamin D3, 24, 25-dihydroxyvitamin D3 and 1α, 25-dihydroxyvitamin D3) in Plasma and its Application to Clinical Studies" Anal. Sci.13. 255-261 (1997)
[文献書誌] Akiko Shimoyamada: "In Vivo Metabolism of 24R, 25-dihydroxyvitamin D3-Structure of Its Major Bile Metabolite" Biochim. Biophys. Acta. 1346. 147-157 (1997)
[文献書誌] Yoichi Miyamoto: "1α, 25-Dihydroxyvitamin D_324-Hydroxylase Hydroxylates the Carbon at the End of the Side Chain of the C-24-Fluorinated Analog of 1a, 25-Dihydroxyvitamin D_3" J. Biol. Chem.272. 14115-14119 (1997)
[文献書誌] Mithuhiro Yamaguchi: "3b, 5a-Dihydroxycholestan-6-one exists in human blood" Biol. Pharm. Bull.20. 1044-1046 (1997)
[文献書誌] Keiko Yamamoto: "Side-chain conformation and activity of vitamin D: design syntheses, and biological activities of conformationally restricted analogs" Vitamin D: Chemistry, Biology and Clinical Applications of the Steroid Hormone. 83-84 (1997)
[文献書誌] Sachiko Yamada: "In vivo metabolism of 24R, 25-dihydroxyvitamin D3: identification of its major bile metabolite. eds" Vitamin D: Chemistry, Biology and Clinical Applications of the Steroid Hormone. 649-650 (1997)
[文献書誌] Masato Shimizu: "Multiple fluorimetric assay of 25-hydroxyvitamin D3, 24, 25-dihydroxyvitamin D3, and 1α, 25-dihydroxyvitamin D3 in human plasma." Vitamin D: Chemistry, Biology and Clinical Applications of the Steroid Hormone. 735-736 (1997)
[文献書誌] Masato Shimizu: "Synthesis of fluorovitamin D analogs for conformational analysis of ligand bound to vitamin D receptor" Vitamin D: Chemistry, Biology and Clinical Applications of the Steroid Hormone. 24-25 (1997)
[文献書誌] Sachiko Yamada: "Conformation-Function Relationship of Vitamin D: Conformational Analysis Predicts Potential Side Chain Structure" J. Med. Chem. in press. 41. (1998)
[文献書誌] 山田幸子: "紫外線、善か悪か?" 化学と教育. 45. 79-82 (1997)
[文献書誌] 山本恵子: "ビタミンD作用発現機構解明をめざして:有機化学的視点から" 医用器材研究所年報. 31. 13-20 (1997)

1997 年度 実績報告書

立体配座制御活性型ビタミンDアナログの合成,受容体結合性、および遺伝子発現調節

研究代表者

山田 幸子 東京医科歯科大学, 医用器材研究所, 教授 (10014078)

研究成果

[文献書誌] Masato Shimizu: "First Fluorometric Method for the Assay of Plasma 1α, 25-Dihydroxyvitamin D3" J. Fluorescence. 7. 235S-237S (1997)

[文献書誌] Masato Shimizu: "Fluorimetric Assay of 1α, 25-Dihydroxyvitamin D3 in Human Plasma" J. Chromatogr. B. 690. 15-23 (1997)

[文献書誌] Xinxiang Wang: "Multiple Fluorometric Assay of Three Major Vitamin D3 Metabolites (25-hydroxyvitamin D3, 24, 25-dihydroxyvitamin D3 and 1α, 25-dihydroxyvitamin D3) in Plasma and its Application to Clinical Studies" Anal. Sci.13. 255-261 (1997)

[文献書誌] Akiko Shimoyamada: "In Vivo Metabolism of 24R, 25-dihydroxyvitamin D3-Structure of Its Major Bile Metabolite" Biochim. Biophys. Acta. 1346. 147-157 (1997)

[文献書誌] Yoichi Miyamoto: "1α, 25-Dihydroxyvitamin D_324-Hydroxylase Hydroxylates the Carbon at the End of the Side Chain of the C-24-Fluorinated Analog of 1a, 25-Dihydroxyvitamin D_3" J. Biol. Chem.272. 14115-14119 (1997)

[文献書誌] Mithuhiro Yamaguchi: "3b, 5a-Dihydroxycholestan-6-one exists in human blood" Biol. Pharm. Bull.20. 1044-1046 (1997)

[文献書誌] Keiko Yamamoto: "Side-chain conformation and activity of vitamin D: design syntheses, and biological activities of conformationally restricted analogs" Vitamin D: Chemistry, Biology and Clinical Applications of the Steroid Hormone. 83-84 (1997)

[文献書誌] Sachiko Yamada: "In vivo metabolism of 24R, 25-dihydroxyvitamin D3: identification of its major bile metabolite. eds" Vitamin D: Chemistry, Biology and Clinical Applications of the Steroid Hormone. 649-650 (1997)

[文献書誌] Masato Shimizu: "Multiple fluorimetric assay of 25-hydroxyvitamin D3, 24, 25-dihydroxyvitamin D3, and 1α, 25-dihydroxyvitamin D3 in human plasma." Vitamin D: Chemistry, Biology and Clinical Applications of the Steroid Hormone. 735-736 (1997)

[文献書誌] Masato Shimizu: "Synthesis of fluorovitamin D analogs for conformational analysis of ligand bound to vitamin D receptor" Vitamin D: Chemistry, Biology and Clinical Applications of the Steroid Hormone. 24-25 (1997)

[文献書誌] Sachiko Yamada: "Conformation-Function Relationship of Vitamin D: Conformational Analysis Predicts Potential Side Chain Structure" J. Med. Chem. in press. 41. (1998)

[文献書誌] 山田 幸子: "紫外線、善か悪か?" 化学と教育. 45. 79-82 (1997)

[文献書誌] 山本 恵子: "ビタミンD作用発現機構解明をめざして:有機化学的視点から" 医用器材研究所年報. 31. 13-20 (1997)

1997 年度実績報告書

山田幸子東京医科歯科大学, 医用器材研究所, 教授 (10014078)

[文献書誌] 山田幸子: "紫外線、善か悪か?" 化学と教育. 45. 79-82 (1997)

[文献書誌] 山本恵子: "ビタミンD作用発現機構解明をめざして:有機化学的視点から" 医用器材研究所年報. 31. 13-20 (1997)