DNA複製関連遺伝子の発現制御を担う共通の転写因子DREF

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08250226
• 研究機関: 愛知県がんセンター
• 研究代表者: 廣瀬 富美子 愛知県がんセンター, 生物学部, 研究員 (60208882)
• 研究分担者: 山口 政光 愛知県がんセンター, 生物学部, 室長 (00182460)
• キーワード: DNA複製 / 転写因子 / ショウジョウバエ / DRE / DREF / トランスジェニックフライ

研究概要

本年度は、DREF遺伝子の発現調節部位の解析、並びに個体を用いたDREFの機能解析に必要な遺伝子導入ハエを樹立するとともに突然変異体の作成に着手し、以下の成果を得た。(1)DREF遺伝子の5'非翻訳領域に存在するDREF遺伝子の発現に必須な約10bpからなる配列とそれに結合するタンパク質因子の存在を明らかにした.one hybrid screening法によるこのタンパク質因子の遺伝子単離を開始した.(2)zerknullt遺伝子産物は、DREF遺伝子のプロモーターを負に制御することを明らかにしている。DREF遺伝子の+240〜+254に存在する配列がzerknullt遺伝子産物による負の制御の標的となっていることを明らかにした.zerknullt遺伝子産物による負の制御機構を解析するのに必要な抗zerknulltタンパク質抗体を作製した.(3)野性型DREFおよびdominant negative型DREFタンパク質を、ヒートショックプロモーターあるいは、唾腺、複眼原基特異的に転写されるエンハンサー/プロモーター利用して、異所的に強制発現させる遺伝子導入ハエを複数系統樹立し、唾腺、複眼原基それぞれにおける異所的なDNA複製が起こる結果を得た.(4)DREF遺伝子がbig brain(bib)遺伝子の上流約10kbに位置することを見い出し、bibのP element insertional mutantを入手した。このハエを用いて、Pエレメントのlocal transpositionによって得られるDREF遺伝子の突然変異体をスクリーニングしている.

研究成果

• [文献書誌] Ohno,K: "Transcriptional regulation of the Drosophila CyCA gene by the DNA replication-related element (DRE) and DRE-binding factor (DREF)" Nucleic Acids Res.24. 3942-3946 (1996)
• [文献書誌] Hirose,F.: "Isolation and characterization of cDNA for DREF,a promoter-activating factor for Drosophila DNA replication-related genes." J.Biol.Chem.271. 3930-3937 (1996)
• [文献書誌] Takahashi,Y.: "DNA replication-related elements cooperate to enhance promoter activity of the Drosophila DNA polymerase α 73-kDa subunit geme" J.Biol.Chem.271. 14541-14547 (1996)
• [文献書誌] Yamaguchi,M.: "Roles of multiple promoter elements of the proliferating cell nuclear artigen geme during Drosophila development" Genes to cells.1. 47-58 (1996)
• [文献書誌] Aoyagi,N.: "DNA polymerase ε from Drosophila melanogaster" Biochem.Biophys.Ros.Commun.230. 297-301 (1997)