標的遺伝子組み換え法によるサイトカインの炎症反応における役割の解析

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08252203
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 岩倉 洋一郎 東京大学, 医科学研究所, 教授 (10089120)
• 研究分担者: 田川 陽一 東京大学, 医科学研究所, 教務職員 (70262079) ; 浅野 雅秀 東京大学, 医科学研究所, 助手 (50251450)
• キーワード: 標的遺伝子組み換え / ノックアウトマウス / サイトカイン / インターロイキン1 / インターフェロンγ / エンドトキシンショック / 炎症性発熱 / ConA誘導肝炎

研究概要

1.インターロイキン-1(IL-1)遺伝子ノックアウト(KO)マウスの作製とその解析
昨年度までにIL-1αとIL-1β遺伝子それぞれ単独及びダブルKOマウスを作製しており、今年度はIL-1受容体アンタゴニスト(IL-1ra)遺伝子KOマウスの作製に成功し、IL-1関連遺伝子はすべて破壊した。これらのマウスを用いて、まずLPSによるエンドトキシンショックに対する抵抗性を調べた。IL-1raKOマウスは高感受性を示したが、予想に反してIL-1α/βダブルKOマウスの感受性は野生型と差がなかった。次にテレビン油投与による発熱に対しては、IL-1αKOマウスは野性型と同様に発熱するに対して、IL-1βKOマウスは発熱せず、逆にIL-1raKOマウスは野生型以上に発熱することがわかり、IL-1βが炎症性の発熱を引き起こしていることが明らかとなった。また感染防御では、リステリア菌の感染に対して、IL-1α/βダブルKOマウスは感受性が高いことも明らかとなった。
2.インターフェロン-γ(IFN-γ)のConA誘導肝炎における役割
ConA誘導肝炎は、T細胞から分泌されるサイトカインによって引き起こされ、ヒトのウイルス性肝炎のモデルとして重要である。昨年度にIFN-γKOマウスやlprマウスを用いて、この系ではIFN-γがFasシステムを活性化することにより肝実質細胞のアポトーシスを引き起こしていることを明らかにしたが、今年度はTNF-αKOマウスやiNOSの阻害剤を用いて、更に発症の機構を解析した。IFN-γKOマウスは発症が抑制されたのに対して、TNF-αKOマウスやiNOSの阻害剤であるL-NMMA投与マウスでは発症が抑制されず、これらは発症に関与しないことがわかった。また、ConA投与後に誘導されてくるFasとICEがIFN-γKOマウスでは誘導されないことを見いだし、IFN-γによるEasとICEの発現誘導がFasシステムの感受性を高めている可能性が示唆された。

研究成果

• [文献書誌] Arakawa,H: "Extrachromosomal circular DNAs from differentiating embryonic stem cells" Cell STruc.Funct. (in press). (1997)
• [文献書誌] Asano,M: "Growth retardation and early death of β-1,4-galactosyltransferase knockout mice with augumented proliferation and abnormal differentiation of epithelial cells." EMBO.J.(in press). (1997)
• [文献書誌] Asano,M: "Growth retardation and early death of β-1,4-galactosyltransferase knockout mice with augumented proliferation and abnormal differentiation of epithelial cell." In″Mouse Molecular Genetics″. 26 (1996)
• [文献書誌] Fujisawa,K: "Therapeutic effect of the anti-Fas antibody on arthritis in HTLV-ltax transgenic mice" J.Clin.Invest. 98. 271-278 (1996)
• [文献書誌] Saijo,S: "Involvement of autoimmunity in inflammatory arthropathy that developed in HTLV-1 transgenic mice." Eur.Cytokine Netw.7. 606 (1996)
• [文献書誌] Tagawa,Y: "Resistance of interferon-rdeficient mice against in a T-cell dependent manner." Eur.Cytokine Netw. 7. 505 (1996)
• [文献書誌] Yoshimoto,T: "Interleukin-18(L-18) together with L-12 inhibits lgE synthesis by induction of IFN-Yproduction from activated Boels." Proc. Nat Acad.Scl.USA. (in press). (1997)