PCNA・plutonium遺伝子発現制御と染色体ドメイン境界領域結合因子

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08274225
• 研究機関: 愛知県がんセンター
• 研究代表者: 山口 政光 愛知県がんセンター, 研究所・生物学部, 室長 (00182460)
• 研究分担者: 山岸 正裕 愛知県がんセンター, 研究所・生物学部, 主任研究員 (00220252)
• キーワード: PCNA / ショウジョウバエ / 転写調節エレメント / 染色体ドメイン / 転写因子 / 遺伝子導入動物

研究概要

1)PCNA遺伝子プロモーター内のBEAF結合サイト様配列(-87〜-62)に結合するタンパク因子は、その認識配列の特異性からBEAFと同一のものであると予想し、ゲルシフトアッセイにおいて抗BEAF抗体を用いたスーパーシフトアッセイを行なったが、予想に反して抗体添加の効果は認められなかった。この因子は少なくとも2種類の塩基配列を認識し、PCNA遺伝子の-87〜-62領域以外にもDREやURE領域、DNAポリメラーゼα遺伝子のDRE、さらにはDREF(DRE結合因子)遺伝子プロモーター内の複数の領域にも親和性を示すことが明らかとなった。私たちはこの因子をCFDD(common regulatory factor for DNA replication genes and DREF gene)と名づけた。
2)PCNAプロモーター内のCFDD結合サイトに変異を導入したPCNA-lacZ融合遺伝子を用いてトランスジェニックフライの系統を複数樹立し、各発生段階におけるlacZ発現レベルの定量を行った結果、このサイトがPCNAプロモーター活性を促進する機能をもつことがわかった。

研究成果

• [文献書誌] Yamaguchi,M.et al.: "Roles of multiple promoter elements of the proliferaring cell ……" Genes to Cells. 1. 47-58 (1996)
• [文献書誌] Yamaguchi,M.et al.: "Expression patterns of DNA replication enzymes and the ……" Biol.Cell. 85. 147-155 (1996)
• [文献書誌] Hirose,F.et al.: "Isolation and characterization of cDNA for DREF ……" J.Biol.Chem.271. 3930-3937 (1996)
• [文献書誌] Takahashi,Y.et al.: "DNA replication-related elements cooperate to enhance ……" J.Biol.Chem.271. 14541-14547 (1996)
• [文献書誌] Ryu,J.-R.et al.: "Transcriptional regulation of the Drosophila raf protooncogene" Nucleic Acids Res.(in press). (1997)
• [文献書誌] 山口政光: "DNA複製・修復と発癌" 羊土社, 11 (1996)