情報伝達とリンパ球の機能分化

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08282105
• 研究機関: (財)癌研究会
• 研究代表者: 宮園 浩平 癌研究会, 癌研究所生化学部, 部長 (90209908)
• 研究分担者: 吉村 昭彦 久留米大学, 分子生命科学研究所, 教授 (90182815) ; 徳久 剛史 千葉大学, 医学部, 教授 (20134364) ; 成内 秀雄 東京大学, 医科学研究所, 教授 (10012741) ; 渡邊 武 九州大学, 生体防御医学研究所, 教授 (40028684) ; 田賀 哲也 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 教授 (40192629)
• キーワード: サイトカイン / シグナル伝達 / リンパ球 / STAT / 増殖抑制 / 抗原受容体 / アポトーシス / 免疫異常

研究概要

1.TGF-βのシグナル伝達分子Smad2とSmad3のDNA結合能の解析:Smad2のMH1領域にはエクソン3によってコードされる30アミノ酸からなる領域が存在する。エクソン3を欠いたSmad2とSmad3はAGACというDNA配列に結合するのに対し、Smad2は結合しないことが明らかとなり、エクソン3に相当する部分がDNAへの結合を阻害していることが証明された。AGAC配列はgermlie Ig Cαにも見られ、B細胞で見られるTGF-βによるIgAクラススイッチにはSmad3が関与していることが示唆された。
2.Smadの転写調節能に対するcoactivatorの作用:p300はさまざまな転写因子のcoactivatorとして作用する。我々はp300がTGF-βによる転写活性を増強することを明らかにし、その増強作用がTGF-βレセプターの刺激依存性把Smadとp300が直接結合するためであることを示した。Smad3はC末端側のMH2領域で、一方p300もC末端側の約600アミノ酸からなる領域で結合した。p300はSATとも結合するが、その結合部位はSmadに対する結合部位とは異なっていた。
3.CIS1トランスジェニックマウスの作成と解析:βアクチンプロモーターでCIS1を恒常的に全組織で発現するマウスを作成した。このマウスは成長が遅く体重が少ない、メスマウスは授乳できない、T細胞のIL-2反応が弱い、γδT細胞やNKT細胞が激減している、またTCRとCD28による刺激によるTh0からTh2への分化が亢進している、などが明らかとなった。これはSTAT5aやSTAT5bの欠損マウスの表現型にきわめて類似していた。

研究成果

• [文献書誌] Saitoh,M., Nishitoh,H., Miyazono,K., et al.: "Mammalian thioreodxin is a direct inhibitor of apoptosis signal-regulating kinase(ASK)1" EMBOJ.17. 2596-2606 (1998)
• [文献書誌] Nishitoh,H., Saitoh,M., Miyazono,K., et al.: "ASK1 is essential for JNK/SAPK activation by TRAF2" Molecul.Cell. 2. 389-395 (1998)
• [文献書誌] Kawabata,M., Inoue,H., Miyazono,K., et al.: "Smad proteins exist as monomers in vivo and undergo homo-and hetero-oligomerization upon activation by serine/threonine kinase receptors" EMBOJ.17. 4056-4065 (1998)
• [文献書誌] Yagi,K., Goto,D., Miyazono,K., et al.: "Alternatively-spliced variant of Smad2 lacking exon3 : Comparison with wild-type Smad2 and Smad3" J.Biol.Chem.274. 703-709 (1999)
• [文献書誌] Okabe,S., Fukuda,T., Tokuhisa,T.et al.: "BAZF, a novel Bcl6 homologue, functions as a transcriptional repressor" Mol.Cell.Biol.18. 4235-4244 (1998)
• [文献書誌] Yasukawa,H., Misawa,H., Yoshimura,A.et al.: "The JAK-binding protein JAB inhibits Janus tyrosine kinase activity through binding in the activation loop" EMBOJ.in press. (1999)