膠芽腫に対する新しい治療戦略

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08407044
• 研究種目: 基盤研究(A)
• 研究機関: 熊本大学
• 研究代表者: 生塩 之敬 熊本大学, 医学部, 教授 (20028583)
• 研究分担者: 竹島 秀雄 熊本大学, 医学部, 助手 (70244134) ; 西 徹 熊本大学, 医学部・付属病院, 助手 (00264309) ; 河内 正人 熊本大学, 医学部, 講師 (70178218) ; 倉津 純一 熊本大学, 医学部, 助教授 (20145296)
• キーワード: グリオーマ / マクロファージ / 免疫 / 遺伝子療法 / サイトカイン / 抗癌剤 / 増殖因子

研究概要

グリオーマ細胞培養上清中より分離・精製した単球遊走因子(monocyte chemoattractant protein-1:MCP-1)によるグリオーマ治療への応用にむけて本年度はグリオーマ細胞内への効率的MCP-1遺伝子導入法の確立、MCP-1遺伝子導入細胞の生物学的特性、MCP-1受容体遺伝子の単離とその発現調節機構について検討した。グリオーマ脳内移植ラットに対しMCP-1プラスミドを頚動脈内注入し電気遺伝子導入法を行うことにより、MCP-1遺伝子がグリオーマに導入されグリオーマ細胞のMCP-1発現増加とそれに伴うマクロファージの浸潤、グリオーマの増殖抑制効果を確認した。さらにin vitroにおいてグリオーマ細胞にMCP-1遺伝子を導入し、得られた高MCP-1発現グリオーマ細胞クローンの増殖能、浸潤能などの生物学的特性を検討中である。
MCP-1受容体C-DNAをプローブとしてヒトEMBL3 SP6/T7遺伝子ライブラリーをスクリーニングし、得られた陽性クローンからMCP-1受容体遺伝子が3つのエクソンと2つのイントロンから構成され、いくつかの特徴的転写因子の結合配列を含んでいることを明らかにした。またマクロファージ腫瘍細胞障害性に関与する転写因子NF-IL6の認識配列が存在し、MCP-1を介したマクロファージの抗腫瘍効果を示唆する結果が得られた。現在、さらにプロモーター上流の解析を進め、MCP-1受容体の発現刺激に関し検討中である。
またグリオーマによる髄液腔内播種および髄液を介したグリオーマ局所への効率的drug-delivery systemを開発するために抗癌剤含有リポゾームを作製して、髄液腔内薬物動態、生体に対する影響、グリオーマ髄液腔内播種に対する抗腫瘍効果についても検討し、有効な治療手段となりうることを示した。

研究成果

• [文献書誌] Kazuya Hamada: "Expression and alternative aplicing of Pit-1 messenger ribonucleic acid in pituitary adenomas." Neurosurgery. 38(2). 362-366 (1996)
• [文献書誌] Kimio Yoshizato: "Increased monocyte chemoattractant protein-1 expression by tumor necrosis factor-α can mediate macrophage infiltration in gliomas." International Journal of Oncology. 4. 493-497 (1996)
• [文献書誌] Jun-ichi Kuratsu: "Epidemiologic study of primary intracranial tumors.A regional survey in Kumamoto prefecture in the southern part of Japan." Journal of Neurosurgery. 84. 946-950 (1996)
• [文献書誌] Toru Nishi: "High-efficiency in vivo gene transfer using intra-arterial plasmid DNA injection following in vivo electroporation." Cancer Research. 56. 1050-1055 (1996)
• [文献書誌] Isao Kitamura: "Intrathecal Chemotherapy with 1,3-Bis(2-choroethyl)-1-nitrosourea Encapsulated into Hybrid Liposomes for Meningeal Gliomatosis:An Experimental Study." Cancer Research. 56. 3986-3992 (1996)
• [文献書誌] Sigetosi Yano: "Regulation of CCAAT/enhancer-binding protein family members by stimulation of glutamate receptors in cultured rat cortical astrocytes." American Society for Biochemistry and Molecular Biology. 271(38). 23520-23527 (1996)
• [文献書誌] Masahito Kurino: "Cyclic AMP Inhibits Activation of Mitogen-Activated Protein Kinase and Crll Proliferation in Response to Growth factors in Cultured Rat Cortical Astrocytes." Journal of Neurochemistry. 67. 2246-2255 (1996)
• [文献書誌] Toru Nishi: "Von Hipplel-Lindau disease:the new era after cloning of the von Hippel-Londau disease gene." Critical Reviews in Neurosurgey. 6. 364-368 (1996)
• [文献書誌] Kazuya Hamada: "Expression of tissue factor correlates with grade of melignancy in human glioma." Cancer. 77. 1877-1883 (1996)