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SINEの転移挿入反応の分子機構に関しては、未知の部分が多く、SINEの逆転写産物をcDNA化する逆転写酵素の由来が明らかにされていないことから、本研究計画では、以下の点について実験を行った。
1.SINEの転移に用いられる逆転写酵素の由来及び特性の解明
初めにカセットPCR法を用いてヘビクビガメゲノム中のCR1の3′末端から5′上流に向かってウォーキングを行った。
2.SINEの初期生成に関与したレトロウィルスの単離
カメのゲノムよりレトロウィルスあるいはLTR型のレトロトランスポゾンを単離することを試みた。
3.5′LTR領域の延期配列の決定
A カセットPCR法を用いて、逆転写酵素の保存モチーフの領域から5′上流にむかってウォーキングを行った。
B 逆転写酵素保存モチーフのPCR産物をプローブに用いて、ゲノムから直接クローンを単離した。
実験は現在も進行中であり、様々なデータについて現在検討中、あるいは今後も引き続き検討を加えていく予定である。
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