| 研究概要 |
乾燥ストレスによって誘導されるrd29遺伝子とrd22遺伝子の転写開始領域をトランスジェニック植物実験系を用いて解析し、rd29遺伝子に関してはABAによらない発現に関与するシス因子DREを同定し、更にrd22遺伝子に関しては67塩基の領域に、発現制御に関与する領域を同定した。本研究では、乾燥ストレスによる発現誘導に関与するシスエレメントに結合するDNA結合タンパク質のcDNAをクローニングしてその転写機構について解析した。
1、rd29遺伝子の乾燥ストレスによる転写誘導に関与するシスエレメントDREに結合するDNA結合タンパク質のcDNAを酵母のone-hybrid法を用いて2種類クローニングした。
2、rd22遺伝子の発現誘導に関与する67塩基に結合するタンパク質のcDNAをSouthwestern法を用いて2種類クローニングし、その内1種類のクローンの塩基配列を決定し、MYC転写制御因子のDNA結合ドメインと相同性があることを明らかにした。
3、rd22遺伝子に関して67塩基の領域のなかにMYB,MYCの結合配列が制御に関与するシス因子であることを明らかにした。
4、rd22遺伝子の乾燥ストレスによる発現誘導に必要なタンパク質因子に転写制御因子が関与するかどうか既にクローン化している乾燥ストレス誘導性の転写制御因子のMYB相同性遺伝子について解析を行い、このMYB相同性遺伝子の蛋白質がrd22遺伝子のMYB認識配列に結合することをゲルシフト法を用いて明らかにした。
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