| 研究概要 |
平成8年度までの研究により、申請者は、ウシ初乳中にマウスLM線維芽細胞の増殖を仰制する因子が存在し、その作用はアポトーシスによるものであることを明らかにした。
1 平成9年度はまずこの因子の精製を限外濾過、イオン交換クロマトグラフィー、逆そうクロマトグラフィーを用いて行った。その結果、この画分には高濃度のIGF-Iが含まれていた。そこでIGF-IのLM細胞に対する影響を検討したところ、驚くべきことにIGF-IはLM細胞のアポトーシスを誘導した。また、初乳由来の活性fractionを、IGF-I抗体固定アフィニティーカラムに繰り返し通したところ、細胞増殖抑制活性が低下したことから、初乳中に含まれるLM細胞増殖抑制活性は初乳中に含まれるIGF-Iによるものであることが明らかになった。
2 LM細胞に対するIGF-Iの作用について検討した。まず、IGF-Iレセプターについて検討した結果、LM細胞には高親和性及び低親和性のIGF-Iレセプターが存在し、その数は他の細胞(Balb/c3T3,L6細胞)と同程度であった。また、チロシンキナーゼ阻害剤であるハービマイシンAはIGF-Iの細胞死誘導作用えお阻害した。
以上の結果から、初乳中に大量に含まれるIGF-IはLM細胞のアポトーシスを誘導し、その作用にチロシンキナーゼの関与することが示された。
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