鶏リポプロテインレセプターの単離精製とその機能・動態

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08456137
• 研究機関: 東北大学
• 研究代表者: 秋葉 征夫 東北大学, 農学部, 教授 (30005631)
• 研究分担者: 佐藤 幹 東北大学, 農学部, 助手 (20250730)
• キーワード: 鶏 / リポプロテインレセプター / カイロミクロンレムナント / VLDL レムナント

研究概要

(1)前年度の研究で明らかとなった鶏肝細胞膜のリポプロテインbindingがレセプターで起きていることを確認するために、鶏初代培養肝細胞を用いて^<125>I-リポプロテインの取り込み試験を行った。その結果、鶏肝細胞膜中にはLDLとVLDLレムナントと結合するレセプターがそれぞれ存在し、カイロミクロンレムナイトはその両者によって取り込まれることを確認した。
(2)前年度に調整法を確立した鶏リポプロテインあるいはレムナントをBiotion標識し、肝細胞膜からTriton X-100で抽出した蛋白質をSDS-PAGしてLigand blottingを行った。その結果、鶏肝細胞膜に105、115および145kDaの3種のレセプター蛋白質が検出された。
(3)ハイドロキシアパタイト、鶏LDLをリガントとしたアフィニティークロマトおよびMono Qによる陰イオンクロマトにより、105および115kDaのリポプロテインレセプターを精製することに成功した。
(4)精製したリポプロテインレセプターのリガンドはapo Bであり、N末端アミノ酸配列より新規タンパク質であることが明らかとなった。また、115kDaのレセプタータンパク質は糖鎖を持つことが確認された。

研究成果

• [文献書誌] K.Sato, Y.Akiba, M.Horiguchi: "A modified purification procedure of adipose tissue lipoprotein lipase in chickens and rats" Animal Science and Technology. 68. 948-951 (1997)
• [文献書誌] K.Sato, Y.Akiba, M.Horiguchi: "Species difference between chickens and rats in chemical properties of adipose tissue lipoprotein lipase." Comp.Biochem.Physiol.118A. 855-858 (1997)
• [文献書誌] K.Sato, K.Suzuki, Y.Akiba: "Species difference in substrate specificity of lipoprotein lipase purified from chickens and rats" Comp.Biochem.Physiol. 119A. 569-573 (1998)
• [文献書誌] K.Sato, Y.Akiba et al.: "Characterization of Kinetic parameters in lipoprtein lipase-mediated hydrolysis of mono fatty acid rich lipoproteins in chickens" J.Nutrition. (accepted).