化学物質・紫外線曝露に対する細胞特異的反応機構の分子生物学的研究

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08457115
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 研究機関: 神戸大学
• 研究代表者: 住野 公昭 神戸大学, 医学部, 教授 (90030832)
• 研究分担者: 李 明鎭 神戸大学, 医学部, 助手 (20273766) ; 西尾 久英 神戸大学, 医学部, 助教授 (80189258)
• キーワード: 化学物質 / 紫外線 / トリハロメタン / クロロホルム / 遺伝子転写産物 / トロンボスポンジン / げっ歯類C型レトロウイルス / 発癌

研究概要

本研究の中核となる実験は、化学物質・紫外線曝露によって変動する遺伝子転写産物のスクリーニングである。申請者らは、この実験の基礎となる技術として、Differential display法を採用した。平成8年度の実験成果は、次の通りである。マウスに、トリハロメタンの代表物質であるクロロホルムを腹腔内投与した後3、6時間で屠殺し、各臓器よりRNAを抽出し、RT-PCRを利用してRNAのフィンガープリントを得た(Differential display法)。クロロホルムに曝露された腎臓、曝露されなかった腎臓のRNAのフィンガープリントを経時的に比較検討したところ、クロロホルムによって誘導される2種類の遺伝子転写産物を得た。この誘導された遺伝子転写産物の塩基配列を自動シーケンサーを用いて調べたところ、トロンボスポンジンと齧歯類C型レトロウイルス(プロウイルス)の塩基配列の一部と同一であった。腎臓のトロンボスポンジンはサイトカインで誘導される蛋白であり、クロロホルムによる誘導は、サイトカインを介する二次性のものである可能性がある。またクロロホルムにより何らかの機転が働きプロウイルスが活性化したのは、クロロホルム発癌の機序の解明につながる可能性があり、非常に興味深い。平成9年度は、これらの成果を踏まえて、次のような実験を行う予定である。すなわち、他臓器についても、クロロホルムによって変動する遺伝子転写産物を同定する。また、マウス各臓器に由来する培養細胞をクロロホルムあるいは他のトリハロメタンや紫外線照射を行い、それによって変動する遺伝子転写産物を同定する。これら一連の動物実験、培養細胞実験の結果から、化学物質や紫外線による細胞障害あるいは発癌の機序が次第に明らかになっていくことが期待できる。

研究成果

• [文献書誌] Lee MJ,Saijoh K,Nestler EJ,Duman RS,Sumino K: "Regional differences in expression of osteonectin mRNA after administration of cadimium to rats." Arch Toxicol. 69. 590-595 (1995)
• [文献書誌] Saijoh K,Saito N,Lee MJ,Fujii M,Kobayashi T,Sumino K: "Molecular cloning of cDNA encoding a bovine Selenoprotein P-like protein containing 12 seleno-cysteins and a (His-Pro) rich domain insertion,and its regional expression" Molecular Brain Research. 30. 301-311 (1995)
• [文献書誌] Lee MJ,Saijoh N,Sumino K,et al: "Gene regulation of metalloproteins under the exposure of heavy metals.Sumino K(ed.)," Environmental and Occupational Chemical Hazards. 2. 115-120 (1994)