中枢ミエリン特異的遺伝子MOBPの基礎的・臨床的研究

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08457190
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 佐古田 三郎 大阪大学, 医学部・附属病院, 助教授 (00178625)
• 研究分担者: 西村 知也 大阪大学, 医学部・附属病院, 医員 ; 芳川 浩男 大阪大学, 医学部, 助手 (90273680)
• キーワード: MOBP / myelin / knockout / cDNA

研究概要

(1)変異マウスの作製:myelin-associated oligodendrocytic basic protein(MOBP)は申請者らによって発見された中枢ミエリンに特異的蛋白である。今回の研究ではgene targeting法にてこの遺伝子をknockoutした。この変異マウスにおいて、Sourthern blot解析では確かにゲノムがtargeted disruptionしており,その結果Western blot解析ではMOBP蛋白を認めなかった。しかし,6ヶ月経った現在も神経学的症状は認めない。電子顕微鏡で観察しても髄鞘形成には異常を認めなかった。しかし,タニタン酸固定にて中枢神経特異的髄鞘構造物であるradial component(RC)を観察すると変異マウスではRCの走行異常が認められた。現在RCの機能等検討中である。(2)実験的自己免疫性脳脊髄炎(EAE)の作製:MOBPのcDNAによってコードされると思われる蛋白を合成しLewis Ratに免疫し,その神経症状と神経病理学的検討を行った。一部病理学的に異常を認めたものの,EAEは誘導できなかった。(3)ヒトcDNAのクローニング:ラットcDNAではMOBP-81が圧倒的に頻度が高いが,ヒトcDNAではそのアイソフォーム構成は不明である。PCRなどを含めヒトで検討中であるがMOBP-81に相当するものは存在するがその頻度は低くラットとの違いが示唆されたが,もう少し検討を要す。(4)MOBP蛋白の精製:ラットの抗体を用いて蛋白精製を行ってきたが,MOBP蛋白が溶解困難であるため分子修飾については未だ不明である。

研究成果

• [文献書誌] Okuda Y,Sakoda S,Fujimura H,Yanagihara T.: "Pentxifylline delays the onset of experimental allergic encephalomyelitis in mice by modulating cytokine production in peripheral blood mononuclear cells." Immunopharmacol. 35. 141-148 (1996)
• [文献書誌] Okuda Y,Sakoda S,Shimaoka M,Yanagihara T.: "Nitric oxide induces apoptosis in mouse splenic T lymphocytes." Immunol.Lett.52. 135-138 (1996)
• [文献書誌] Okuda Y,Sakoda S,Fujimura H,Yanagihara T.: "Nitric oxide via inducible isoform of nitric oxice synthase is possible factor to eliminate inflammatory cells from the centrral nervous system of mice with experimental allergic encephalomyelitis." J.Neuroimmunol.73. 107-116 (1997)
• [文献書誌] Fujimura H,Nakatsuji Y,Sakoda S,Toyooka K,et al.: "Demyelination in svere combined immunodeficient mice by intracisternal injection of cerebrospinal fluid cells from patients with multiple sclerosis : neuropathological investigation." Acta Neuropathol (in press).
• [文献書誌] 須貝文宣、藤本哲雄、阿部和夫、佐古田三郎、柳原武彦 その他: "脊髄動静脈奇形の一例" Brain and Nerve. 48. 1058 (1996)
• [文献書誌] 佐古田三郎: "新内科書" 鎌田武信ら編, 6 (1996)