1997 年度実績報告書

異常甲状腺ホルモン受容体の機能解析に関する分子生物学および発生工学的研究

研究課題

研究課題/領域番号	08457262
研究機関	浜松医科大学
研究代表者	中村浩淑浜松医科大学, 医学部, 教授 (60164331)
研究分担者	西山孝三浜松医科大学, 医学部, 助手 (50273181)
キーワード	甲状腺ホルモン受容体 / トランスジェニックマウス / サイレンシング作用 / two hybrid system / ドミナントネガティブ作用 / ビタミンD受容体
研究概要	正常甲状腺ホルモン受容体(TR)ならびに甲状腺ホルモン不応症患者から発見された異常TRの機能解析の研究を行い、以下の成果を得た。 A.C端欠失異常TR、βF451XおよびαF397Xを発現させたトランスジェニック(TG)マウスの作成と解析患者から得られた異常TRβF451Xと、それと同一の異常を持つよう構築したαF397Xをそれぞれ発現させたTGマウスを作成した。βF451X-マウスの出生率は16%であったが、αF397X発現マウスの作成は極めて困難で、出生直後死亡した1匹を加えても3%であった。得られた2匹のαF397Xマウスに体重増加の減少がみられた。T4、TSHの基礎値に差は見られなかった。TGマウスで自発運動の亢進傾向が見られたが、学習能力には異常が無かった。αF397Xマウスの作成がきわめて困難であり発育不良もみられたことから、TRα1の異常は出生に重篤な障害を与える可能性が強いと考えられた。 B.酵母two hybrid systemを用いた各種異常TRβのヘテロダイマー形成能の検討 GAL4-TR、VP16-RXRにGAL4-応答レポーター遺伝子を組み合わせたtwo hybrid systemで、TRとRXRのヘテロダイマー形成能を定量的に測定する新しい方法を開発した。異常TRのヘテロダイマー形成能とドミナントネガティブ効果に良い相関が見られ、ドミナントネガティブ作用にTR/RXR形成が重要であることを示した。 C.TRのサイトレンシング((基礎転写活性抑制)作用の解析 βF451とαF397Xのサイレンシング作用機構を調べ、βF451XはRXRとの親和性、コレプレッサーとの結合能が正常TRβより有意に高く、一方αF397Xでは正常TRα1と差がない結果を得た。このことからβF451XとαF397Xはともに強い抑制作用を持つが、その機序は必ずしも同一ではない可能性が推測された。 D.TRβ1N末端A/B領域機能の検討 TRβ1のN末端A/B領域の機能を調べ、アミノ酸32から51の部分に転写活性を高める機能、また51から94の部分に抑制する機能を見いだした。さらにこれらがヘテロダイマー形成に関係するという興味深い成績を得た。 E.ビタミンD受容体(VDR)とTRの転写相互作用 TRとVDRはリガンド存在時のみ、互いに転写活性を抑制することを見つけた。この機序として、アクチベータ-を拮抗しあう可能性を強く示唆する成績を得た。

研究成果
(7件)

すべてその他

すべて文献書誌 (7件)

[文献書誌] 中村浩淑: "受容体異常症と甲状腺ホルモン作用のメカニズム" 内科. 80. 935-941 (1997)
[文献書誌] 中村浩淑: "核内レセプターの転写制御機構に関与するコファクター蛋白" 内分泌・糖尿病科. 4. 456-466 (1997)
[文献書誌] 中村浩淑: "甲状腺ホルモン受容体" 日本臨牀. 55. 570-573 (1997)
[文献書誌] Tagami,Nakamura et al.: "Dimerization properties of mutant thyroid hormone β-receptors with auxiliary proteins" J.Endocrinol.154. 523-533 (1997)
[文献書誌] Nakamura et al.: "High incidence of positive autoantibodies against thyroid peroxidase and thyroglobulin in patients with sarcoidosis" Clin.Endocrinol.46. 467-472 (1997)
[文献書誌] Nishiyama,Nakamura et al.: "Difference in dominant negative activities between mutant thyroid hormone receptors α1 and β1 with an identical truncation in the extreme carboxyl-terminal tau4 domain" Mol Cell Endocrinol. (in press).
[文献書誌] 中村浩淑: "最新内科学大系2.内分泌代謝疾患甲状腺ホルモン受容体とその異常" 井村裕夫他(編)中山書店, 290-298 (1997)

1997 年度 実績報告書

異常甲状腺ホルモン受容体の機能解析に関する分子生物学および発生工学的研究

研究代表者

中村 浩淑 浜松医科大学, 医学部, 教授 (60164331)

研究成果

[文献書誌] 中村浩淑: "受容体異常症と甲状腺ホルモン作用のメカニズム" 内科. 80. 935-941 (1997)

[文献書誌] 中村浩淑: "核内レセプターの転写制御機構に関与するコファクター蛋白" 内分泌・糖尿病科. 4. 456-466 (1997)

[文献書誌] 中村浩淑: "甲状腺ホルモン受容体" 日本臨牀. 55. 570-573 (1997)

[文献書誌] Tagami,Nakamura et al.: "Dimerization properties of mutant thyroid hormone β-receptors with auxiliary proteins" J.Endocrinol.154. 523-533 (1997)

[文献書誌] Nakamura et al.: "High incidence of positive autoantibodies against thyroid peroxidase and thyroglobulin in patients with sarcoidosis" Clin.Endocrinol.46. 467-472 (1997)

[文献書誌] Nishiyama,Nakamura et al.: "Difference in dominant negative activities between mutant thyroid hormone receptors α1 and β1 with an identical truncation in the extreme carboxyl-terminal tau4 domain" Mol Cell Endocrinol. (in press).

[文献書誌] 中村浩淑: "最新内科学大系2.内分泌代謝疾患 甲状腺ホルモン受容体とその異常" 井村裕夫 他(編)中山書店, 290-298 (1997)

1997 年度実績報告書

中村浩淑浜松医科大学, 医学部, 教授 (60164331)

[文献書誌] 中村浩淑: "最新内科学大系2.内分泌代謝疾患甲状腺ホルモン受容体とその異常" 井村裕夫他(編)中山書店, 290-298 (1997)