1997 年度実績報告書

ヒト白血病・前白血病のアポトーシスに関する基礎的並びに臨床的研究

研究課題

研究課題/領域番号	08457276
研究機関	京都大学
研究代表者	吉田彌太郎京都大学, 東南アジア研究センター, 教授 (80064525)
研究分担者	笹田昌孝京都大学, 医療短期大学部・衛生技術学科, 教授 (30144364) 小熊茂京都大学, 医学研究科・器官病態学講座血液病態学, 助手 (00169260)
キーワード	アポトーシス / エンドヌクレアーゼ / 白血病・前白血病 / 血球分化
研究概要	1.Mgイオン・Mnイオン依存性エンドヌクレアーゼの精製とクローニング: ヒト白血病細胞株p39の核及び細胞質から2種類のMgイオン・Mnイオン依存性エンドヌクレアーゼを単離した。核蛋白由来のものはゲル濾過と活性ゲルでの分子量は30kD、細胞質蛋白由来は65〜70kDのダイマーであった。いずれの活性も既知のアポトーシス阻害物質で抑制され、また標的細胞核の3'-OH,5'-Pのアポトーシス型DNA切断を呈した。目下クローニングを急いでいる。 2.白血病・前白血病細胞の分化とポトーシスアポトーシスの生化学的指標となるDNA切断の責任酵素はエンドヌクレアーゼである。自己核消化法を用いた実験で、血球には少なくとも3種類のエンドヌクレアーゼが核内に存在する。それらは血球分化に応じて特徴的な分布を示し、幹細胞や白血病・前白血病細胞はMgイオン依存性エンドヌクレアーゼの活性が存在するが、分化に伴いその活性は消失し、Caイオン・Mgイオン依存性エンドヌクレアーゼや酸性エンドヌクレアーゼの活性が出現する。CD34細胞・p39細胞・MDS92細胞・MDS-L細胞で分化誘導ないし自発性分化に際して、アポトーシスと分化形質発現とは解難するので、血球分化とアポトーシスとは相互に関連はするものの異なった事象と考えられる。 3.パルスフィールド法によるアポトーシスの研究アポトーシスのDNA切断化はパルスフィールド法でのモデル実験では2-5Mbの巨大DNA切断に始まり、順次的な切断サイズの縮小をへて典型的な50Kb以下の切断に至ることがわかった。Dichloroisocoumarineはこの最後過程を選択的に阻害することを確認した。

研究成果
(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Anzai N, et al.: "Ca2+/Mg2+-dependent endonuclease in marrow CD34 positive and erythroid cells in myelodysplasia." Leukemia Res. 21. 731-734 (1997)
[文献書誌] Anzai N, et al.: "Distribution of endogenous endonuclease activities capable of producing internucleosomal DNA cleavage in hematopoietic cells." Int J Haematol. 66. 387-390 (1997)
[文献書誌] Kawabata H, et al.: "High levels of Ga2+-independent endonuclease activity capable of producing nucleosomal-size DNA fragmentation in non-adherent marrow mononuclear cell nuclei from patients with myelodysplastic syndromes and acute myeloid leukemia." Leukemia. 10. 67-73 (1996)
[文献書誌] Kawabata H, et al.: "Mg2+ or Mn2+ -dependent endonuclease activities of human myeloid leukemia cells capable of producing nucleosoma-size DNA fragmentation." Biochem Biophys Res Com. 233. 133-138 (1997)
[文献書誌] Yoshida Y, et al.: "Apoptosis in normal and neoplastic hematopoiesis." Crit Rev Oncol/Hematol. 24. 185-211 (1996)
[文献書誌] Yoshida Y, et al.: "Apoptosis as a cell biological abnormality in myelodysplasia." Path Biol. 45. 473-578 (1997)

1997 年度 実績報告書

ヒト白血病・前白血病のアポトーシスに関する基礎的並びに臨床的研究

研究代表者

吉田 彌太郎 京都大学, 東南アジア研究センター, 教授 (80064525)

研究成果

[文献書誌] Anzai N, et al.: "Ca2+/Mg2+-dependent endonuclease in marrow CD34 positive and erythroid cells in myelodysplasia." Leukemia Res. 21. 731-734 (1997)

[文献書誌] Anzai N, et al.: "Distribution of endogenous endonuclease activities capable of producing internucleosomal DNA cleavage in hematopoietic cells." Int J Haematol. 66. 387-390 (1997)

[文献書誌] Kawabata H, et al.: "High levels of Ga2+-independent endonuclease activity capable of producing nucleosomal-size DNA fragmentation in non-adherent marrow mononuclear cell nuclei from patients with myelodysplastic syndromes and acute myeloid leukemia." Leukemia. 10. 67-73 (1996)

[文献書誌] Kawabata H, et al.: "Mg2+ or Mn2+ -dependent endonuclease activities of human myeloid leukemia cells capable of producing nucleosoma-size DNA fragmentation." Biochem Biophys Res Com. 233. 133-138 (1997)

[文献書誌] Yoshida Y, et al.: "Apoptosis in normal and neoplastic hematopoiesis." Crit Rev Oncol/Hematol. 24. 185-211 (1996)

[文献書誌] Yoshida Y, et al.: "Apoptosis as a cell biological abnormality in myelodysplasia." Path Biol. 45. 473-578 (1997)

1997 年度実績報告書

吉田彌太郎京都大学, 東南アジア研究センター, 教授 (80064525)