胆石生成に関連した肝細胞コレステロール代謝の分子生物学的解明

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08457327
• 研究機関: 宮崎医科大学
• 研究代表者: 瀬戸口 敏明 宮崎医科大学, 医学部, 教授 (40041420)
• キーワード: cholesterol 7α-hydroxylase / 酵素活性 / 酵素蛋白量 / 胆汁酸

研究概要

1.微量ヒト肝cholesterol 7α-hydroxylase(P450のひとつ)の活性測定
mitochondriaのcholesterol代謝に関する例えば27hydroxylationなるP450は可溶化することによって活性値が飛躍的に増加するが、microsomeに存在するP450であるcholesterl 7α-hydroxylaseは化溶化してもその効果はない。
以上のことはpublishする予定。
2.コレステロール代謝とvitamin D_3代謝の接点の追求
コレステロール側鎖27-hydroxylationとvitamin D_3 25-hydroxylayionは同一の酵素であると報告され、後者はvitamin D_3 1α-hydroxylationも同時に行うという報告もある。この時点でvitamin D_3の1α-24-および25-hydroxylationについて酵素の活性測定、mRNA測定、酵素蛋白量測定の確立をはかった。これらの問題の一部は下記のようにpublishした。
Nakamura,Y.,Eto,T.-A.,Taniguchi,T.,Miyamoto,K.,Nagatomo,J.,Shiotsuki,H.,Sueta,H.,Higashi,S.,Okuda,K-I.and Setoguchi,T.:Purification and characterization of 25-hydroxyvitamin D_3 1α-hydroxylase from rat kidney mitochondria.
FEBS Letters419(1):45-48,1997.
Eto,T.-A.,Nakamura,Y.,Taniguchi,T.,Miyamoto,K.,Nagatomo,J.,Maeda,Y.,Higashi,S.,Okuda,K.-I.and Setoguchi,T.:Assay of 25-hydroxyvitamin D_3 1α-hydroxylase in rat kidney mitochondria.
Analytical Biochemistry,in press,1998.

研究成果

• [文献書誌] Maeda,Y., Setoguchi,T.,et al.: "Sex differences in serum 7α-hydroxycholesterol levels in the rat reflect hepatic acitivity of 3β-hydroxy-Δ^5-C_<27>-steroid dehydrogenase and cholesterol 7α-hydroxylase." Journal of Gastroenterology. 32. 502-506 (1997)
• [文献書誌] Nakamura,Y., Setoguchi,T.,et al.: "Purification and characterization of 25-hydroxyvitamin D_3 1α-hydroxylase from rat kidney mitochondria." FEBS Letters. 419(1). 45-48 (1997)
• [文献書誌] Eto,T.A., Setoguchi,T.,et al.: "Assay of 25-hydroxyvitamin D_3 1α-hydroxylase in rat kidney mitochondria." Analytical Biochemistry. (in press). (1998)
• [文献書誌] Ando,Y., Setoguchi,T.,et al.: "Expression of cholesterol 7α-hydrocylase and Δ ^4-3-ketosteroid 5β-reductase genes in hepatocyte-like rat pancreatic cells." Journal of Lipid Research. (in press). (1998)
• [文献書誌] Kimura,A., Setoguchi,T.,et al.: "Diagnosis of the first Japanese patient with 3-oxo-Δ _4-steroid 5β-reductase deficiency by use of immunoblot analysis." European Journal of Pediatric Surgery. (in press). (1998)