サイトカイン発現ウイルスベクターによる消化器癌腹膜転移の遺伝子治療

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08457328
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 研究機関: 横浜市立大学
• 研究代表者: 天野 富薫 横浜市立大学, 医学部, 講師 (20112485)
• 研究分担者: 服部 聡 横浜市立大学, 医学部, 助手 (40275037) ; 野口 芳一 横浜市立大学, 医学部, 講師 (50180724)
• キーワード: 遺伝子治療 / ウイルスベクター / サイトカイン / インターロイキン-2 / 消化器癌腹膜転移 / ヌードマウス

研究概要

導入効率が良くかつ感染のコントロールが容易なHerpes Simplex Virus Type 1 defective viral vectorにIL-2を組み込み,その発現実験と癌性腹膜炎の治療実験を行い有望な知見を得た.
1.HSV/IL-2の作製
HSV vectorのcytomealo- virus promotorの下流のcloning siteにhuman IL-2またはそのanti-senseを組み込んだ(以下HSV/IL-2).Virus粒子の作製はまず,Rabbit skin cellにHSV/IL-2をelectroporation法にて導入した.Helper virusのsuper infectionは31℃培養下で感染増殖し37℃では増殖できない温度感受性株を用いた.細胞からvirus液を回収しVero cellに感染させ継代増幅し実験に用いた.
2.In vitro experiment
人胃癌細胞株であるMKN45をHSV/IL-2と培養し,培養上清中へのIL-2の産生をELISA法にて測定した.感染効率に応じ高濃度のIL-2の産生を認めた.
3.In vivo experiment
Day 0にMKN45細胞5x10^6個をnude mouseの腹腔内に投与して腹膜転移モデルを作製した.腫瘍移植時(pretreatment),また7,14,21日後にHSV/IL-2を腹腔内投与し,control群やanti-sense投与群と生存率を比較した.PretreatmentではIL-2 vector投与を受けた群では腫瘍は生着せず全例生存し,一方anti-sense vectorには効果はなく,control群と有意な差はなかった.Day 7のHSV/IL-2投与では50%が,day 14の投与では25%が生存した.

研究成果

• [文献書誌] Noguchi Y: "Role of insulin resistance in decreasing lipoprotein lipase activity in tumor-bearing rats" Surgery Today. 26. 271-275 (1996)
• [文献書誌] Noguchi Y: "Are cytokines possible mediators of cancer cachexia?" Surgery Today. 26. 467-475 (1996)
• [文献書誌] Noguchi Y: "The possible role of TNF-α and Interleukin-2 in inducing tumor-associated metabolic alterations." Surgery Today. 26. 36-41 (1996)
• [文献書誌] Sato Y: "Immunohistochemical localozation of facilitated-diffusion glucose transporters in rat pancreatic islet." Tissue & Cell. 28. 637-643 (1996)
• [文献書誌] Nomura K: "The stimulation of decreased lipoprotein lipase activity in the tumor-bearing state by the anti-hyperlipidemic drug Bezafibrate" Surgery Today. 26. 89-94 (1996)
• [文献書誌] Yoshikawa T: "Alimentary hyperglucemia in patients with subtotal gastrectomy is associated with decreased insulin secretion but not with insulin resistance" International Surgery. 81. 32-35 (1996)