動物細胞の転写/複製因子による細胞増殖と細胞死の分子機構

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08457599
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 有賀 寛芳 北海道大学, 薬学部, 教授 (20143505)
• 研究分担者: 平 敬宏 北海道大学, 薬学部, 助手 (70197036)
• キーワード: c-myc / 転写因子 / アポトーシス / cDNAクローニング / 細胞周期 / 癌遺伝子

研究概要

C-MYC複合体形成タンパク質を次々に固定し、新規のものはcDNAクローニングした。これらを大別し、以下まとめる。
1、DNA複製開始因子
MSSP(新規)、PCNA, DNAポリメラーゼαがこの範疇に入る。この内、C-MYCはMSSP, MSSP-1はDNAポリメラーゼα, PCNAと直接結合する。
2、G1/Sチェックポイントタンパク質
cdk2, p21,p107がこの範疇であり、C-MYCはp21, p107と直接結合する。
3、転写因子
新規タンパク質としてAMY-1のcDNAクローニングを行った。AMY-1は分子量11KDa程の小さなタンパク質であるが、通常は細胞質に存在するが、C-MYC発現により核に移行し、C-MYC機能を調節する。G1/Sチェックポイントタンパク質と複合体形成する。
1-3をまとめると次のように考えられる。C-MYC/MSSP複合体はG1/S境界領域ではcdk2/p21複合体に結合することでcdk2を活性化させS期開始のシグナルをあたえ、次にDNAポリメラーゼαがMSSP sideに結合し、実際の複製開始が起きる。次に、p21/C-MYC複合体にPCNAが参入し、C-MYCと拮抗的に作用してPCNA/p210cdk2複合体が形成され、そのPCNAにDNAポリメラーゼδが結合することで更なる複製が進むと考えられる。
4、アポトーシス関連因子
pim-1は直接C-MYCに結合する。更にpim-1結合タンパク質としてPAP-1, No.4の2種cDNAクローニングした。PAP-1はPim-1のリン酸化基質であった。

研究成果

• [文献書誌] Manabe, A: "Transcriptional repression activity of N-myc protein requires phosphorylation by MAP kinase." Biochem. Biophys. Res. Comm.219. 813-823 (1996)
• [文献書誌] Higermoser, C.: "Cloning and characterization of the genomic DNA of the human MSSP gene." Nucleic Acids Res.24. 3856-3857 (1996)
• [文献書誌] Iida, M.: "Induction of apoptosis by MSSP, C-MYC binding proteins." Biol. Pharm. Bull.20. 10-14 (1997)
• [文献書誌] Taira, T.: "A novel G1/S-specific enhancer identified in the human heat shock protein 70 gene" J. Biol. Chem.(in press). (1997)
• [文献書誌] Tsuchiya, T.: "Ku antigen binds to Alu family DNA and represses transcription." J. Biol. Chem.(in press). (1997)
• [文献書誌] Maeda, J.: "AMY-1, a novel C-MYC binding protein that stimulates transcription and transforming activities of C-MYC" Nature. (in press). (1997)